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- 2016-04-05 发布于广西
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第六章从杂交育种到基因工程
第2节基因工程及其应用
1.限制性内切酶及其特点
在生物体内有一类酶,它们能将外来的DNA切断,即能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力,但对自身的DNA却无损害。科学家还注意到,这种酶是从DNA分子内部切断DNA的,因此,这种酶称做限制性内切酶。美国生物学家内森斯和史密斯因发现了限制性内切酶而获得1978年度的诺贝尔生理学或医学奖。
限制性内切酶通常能识别4~6个碱基长度的特定DNA序列,并能以特定的模式剪切DNA链。一般来说,被识别的DNA序列是回文序列。这种序列的特点是,当从左右两端分别阅读这段双链DNA的碱基序列时,双链上的碱基序列是相同的。按照切割的方式,限制性内切酶可以分为错位切和平切两种,它们分别产生黏性末端和平末端。
目前大约已有500种限制性内切酶,这些酶的命名方式与EcoRI一样遵循统一的规则。第一个字母是分离出此酶的细菌属名的第一个字母,后两个字母为种名的前两个字母,小写,株系数字通常都省略,罗马数字用来表示从同一个细菌中分离出的不同的限制性内切酶。如HpaI和HpaⅡ就是从同一种细菌中分离出来的第一种和第二种内切酶。
几种常用的限制性内切酶及其酶切位点如下表:
几种常用限制性内切酶及其酶切位点
限制性内切酶 识别位点 限制性内切酶 识别位点 EcoRI
XbaI
XhoI
NdeI G↓AATTC
T↓CTAGA
C↓TCGA
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