【推荐】2014年高中生物 第二章 第2节 单克隆抗体课件 新人教版选修3.pptVIP

单克隆抗体 单克隆抗体 1.抗原诱导动物产生的效应B细胞数量有限。 设计方案： 一个B淋巴细胞（只分泌一种特异性抗体） 问题思考 除通过杂交瘤细胞产生单克隆抗体外，还有什么方法？ 5．由单克隆抗体研制而成的“生物导弹”由两部分组成，一是“瞄准装置”，二是杀伤性“弹头”，下列对此描述正确的是(多选)（ ） A．“瞄准装置”是由识别肿瘤的单克隆抗体构成 B．“弹头”是由放射性同位素、化学药物和毒素 等物质构成 C．“弹头”中的药物有选择杀伤肿瘤细胞的功能 D．“生物导弹”是利用细胞工程制备出来的 6.填空题 （1） 技术是单克隆抗体技术的基础。 （2）单克隆抗体与常规抗体相比，最大的优越性 是 （3）动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合的诱导剂外，还可以 采用 。 （4）选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤的 的特点，又具备淋巴细胞的 特点 （5）淋巴细胞是由动物体 中的 细胞分化发育而来。 （6）杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是 * * * 获得杂交细胞 制备单克隆抗体 获得杂种植株 用途 物理、化学方法 （同左） 灭活的病毒 物理（离心、振动、电刺激） 化学（聚乙二醇） 诱导方法 使细胞分散后诱 导细胞融合 去除细胞壁后诱 导原生质体融合 杂交前细胞处理 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性、 植物细胞全能性 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 比较植物、动物细胞融合 1.常规抗体的制备 方法 ： 缺陷： 向动物体内反复注射某种抗原，使动 物产生抗体，然后从动物血清中分离 所需抗体。 产量低，纯度低，特异性差。 为什么产量低？ 为什么纯度低？ 2.抗原比较复杂，可能诱导产生多种效应B细胞，产生多种抗体。 3. 另动物在未接触注射的抗原之前，体内可能就存在多种效应B细胞，多种抗体。 据研究，动物在免疫的过程中，体内产生的特异性抗体种类可达百万种以上，但每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。 如何获得纯度高、产量大的抗体呢？ 小鼠骨髓瘤细胞 （能无限增殖） 细胞融合 克隆 杂交瘤细胞 大量抗体 （1）.定义：克隆单一的杂交瘤细胞 所产生的大量抗体。 2、单克隆抗体 由于每个Ｂ淋巴细胞只能分泌一种抗体，则每个杂交瘤细胞只能分泌一种抗体，由一 个杂交瘤 细胞增殖产生的细胞群分泌的抗体化学成份也是单一的。 （2）制备过程（图解）： 1注射抗原的目的是什么？ 2从小鼠脾脏中提取的B细胞都能产生抗体吗？ 3都能产生所需抗体吗？ 1诱导其融合的方法有哪些？ 2为什么要用许多B细胞和许多瘤细胞融合？ 3用一个B细胞和1个瘤细胞融合行吗？ 1融合后培养液中有几种细胞？ 2其中杂交瘤细胞有几种？ 1怎样筛选出杂交瘤细胞？ 2淘汰了哪些细胞？ 3筛选出的杂交瘤已经符合要求了吗？ 4杂交瘤细胞有何优点？ 1为何要进行克隆化培养？ 2为何进行专一抗体检测？ 3筛选的出杂交瘤细胞为什么还要再次筛选，并多次筛选？怎样筛选？ 1注射到小鼠血液中培养行吗？ 2体内培养为何优于外培养？ 整个制备过程至少要经过两次筛选 第一次筛选在选择性培养基上进行，得到杂交瘤细胞（多种）， 第二次筛选在多孔培养板上进行，在每孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养，并进行专一抗体检测，从而筛选出能产生特异性抗体的细胞群。该筛选要重复多次，确保筛选出的细胞群来自单个杂交瘤细胞。 细胞群是单个杂交瘤细胞克隆得来的，所以产生的抗体必然是化学性质单一的，特异性强的单克隆抗体。这里的单克隆确有单个细胞克隆的含义，只不过克隆的不是B淋巴细胞，而是杂交瘤细胞。 介绍一种选择性培养基 已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两条DNA合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加PEG促融，在筛选培养基上筛选获得杂种细胞。 （2）过程(文字) B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 诱导融合 B-B细胞 B-瘤细胞 瘤-瘤细胞 选择培养 杂交瘤细胞（ B-瘤细胞） 克隆化培养 抗体检测 获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 体外培养 小鼠腹腔内增殖 单克隆抗体 （3）.单克隆抗体的应用： 单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高、产量大 ①作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质的微细差异，并与其特异性结合。具有准确、高效简易、快速的优点。如“早早孕诊断试剂