分子发光—荧光磷光和化学解析：.pptVIP

分子发光—荧光、磷光和化学发光 molecular luminescence analysis 概论 分子荧光和磷光光谱分析法 化学发光分析法 教 学 要 求 掌握荧光的产生、荧光效率及其影响因素；重点掌握溶液强度与溶液浓度的关系及定量分析方法；弄清荧光分析仪器的主要部件及与分子吸收仪器的主要区别。了解磷光分析法及化学发光分析法。 重点：荧光效率及影响因素；溶液强度与溶液浓度的关系及定量分析方法； 难点：荧光的产生，影响荧光效率的因素 概述 一、分子发光的类型 荧光Fluorescence 磷光Phosphorescence 化学发光Chemiluminescence 分子荧光与磷光光谱分析法 molecular fluorescence and phosphorescence 荧光： 16世纪：在矿物和植物提取液中发现荧光； 1575年：Monardes——植物愈创木切片黄色水溶液——天兰色荧光； 1852年：Stokes阐明荧光发射机制（分光计观测奎宁和叶绿素的荧光，发现波长稍长于入射光的波长——认识到荧光为“重新发光”而不是漫射光； 1905年：Wood发现气体分子的共振荧光； 1926年:Gaviola直接测定了荧光寿命； 1923年：荧光X射线光谱； 1964年：原子荧光光谱分析的建立； 1965年：荧光分析在生物分析中广泛应用； 磷光： 15世纪被发现（重晶石在强烈阳光下的发光） 1944年：Lewis提出磷光用于分析的可能性； 1957年：Keirs将磷光分析用于定量分析及多组份混合物分析； 1963年：广泛用于血液及尿液中痕量药物及农药残留量分析； 一、荧光和磷光的产生 luminescence process of molecular fluorescence phosphorescence 1. 分子能级与跃迁 分子能级比原子能级复杂； 在每个电子能级上，都存在振动、转动能级； 基态(S0)→激发态(S1、S2、激发态振动能级)：吸收特定频率的辐射；量子化；跃迁一次到位； 激发态→基态：多种途径和方式；速度最快、激发态寿命最短的途径占优势 2.电子激发态的多重度 3.激发态→基态的能量传递途径 能量传递过程 （4）系间跨跃（Intersystem Conversion，ISC） 系间跨跃是发生在两个不同多重态之间的无辐射跃迁，如从S1到T1，该跃迁是禁阻的。然而，当不同多重态的两个电子能层有较大重叠时，处于这两个能层上的受激电子的自旋方向发生变化，即可通过自旋-轨道耦合而产生无辐射跃迁，该过程称为系间跨跃。 （5）荧光发射 分子电子从单重激发态（Kasha规则）的最低振动能级在很短时间（10-9-10-6s）跃迁到基态各振动能层时所产生的光子辐射称为荧光。由于各种去活化过程的存在，荧光辐射能通常要比激发能量低，或者说，荧光波长大于激发波长（Stokes效应）。 （7）磷光发射 从单重态到三重态分子间发生系间跨跃跃迁后，再经振动弛豫回到三重态最低振动能层，最后，在10-4-10s内跃迁到基态的各振动能层所产生的辐射。在光照停止后，磷光仍可持续一段时间。 二、荧光、磷光与化学结构的关系 1. 荧光量子产率 荧光量子产率也叫荧光效率或量子效率，它表示物质发射荧光的能力，通常用下式表示 或 在产生荧光的过程中，涉及到许多辐射和无辐射跃迁过程，如荧光发射、内转移，系间跨跃和外转移等。很明显，荧光的量子产率，将与上述每一个过程的速率常数有关。 kf :应光发射过程的速率常数。可见，凡是使 kf增加，使其它去活化常数降低的因素均可增加荧光量子产率。通常， kf 由分子结构决定（内因），而其它参数则由化学环境和结构共同决定。分析应用价值：量子产率0.1。2.荧光、磷光与有机化合物结构的关系（1）跃迁类型：通常，具有?—?*及n—?*跃迁结构的分子才会产生荧光。而且?—?*跃迁的量子效率比n—?*跃迁的要大得多（前者?大、寿命短、kISC小）。 2.荧光、磷光和有机化合物分子结构的关系 （1）.跃迁类型：通常，具有?—?*及n—?*跃迁结构的分子才会产生荧光。而且?—?*跃迁的量子效率比n—?*跃迁的要大得多（前者?大、寿命短、kISC小）。 π→π* 跃迁 自旋许可跃迁，有利于荧光发射 n →π*跃迁 自旋禁阻跃迁，有利于磷光发射 （2）.共轭体系：共轭度越大，分子的荧光效率越大，且荧光光谱向长波方向移动。 （3）