4.1 酶工程.ppt

第四章 酶工程 第二节 酶的分离纯化技术 酶的分离纯化应注意的问题： 温度（0~4℃） pH（酶的pH稳定性和溶解度） 盐浓度 搅拌（避免剧烈搅拌和产生泡沫） 微生物污染 溶解度大 分离效果好 不易引起变性 价格便宜 四、膜分离 五、层析分离 凝胶过滤层析 离子交换层析 亲和层析 疏水相互作用层析 …… 实例：脂肪酶的分离纯化 制备修饰酶的目的： 提高酶活力 改进酶的稳定性 允许酶在一个变化的环境中起作用 改变最适pH或最适温度 改变酶的特异性使它能催化不同的底物 改变催化反应类型 提高催化过程的反应效率 杂交酶（杂合酶）：指利用基因工程将来自两种或两种以上的酶的不同结构片段构建成的新酶。 三、生物酶的人工模拟 抗体酶：具有催化活性的抗体 印迹酶：利用分子压印技术制备的酶 （1）分子印迹酶 （2）生物印迹酶 酶反应器：以酶为催化剂进行反应所需要的设备 生物传感器：对生物物质敏感并将其浓度转换为电信号进行检测的仪器。是由固定化的生物敏感材料作识别元件（包括酶、抗体、抗原、微生物、细胞、组织、核酸等生物活性物质）与适当的理化换能器（如氧电极、光敏管、场效应管、压电晶体等等）及信号放大装置构成的分析工具或系统 思考题： 1、盐析沉淀法的基本原理和操作过程？ 2、凝胶过滤与离子交换层析的原理与过程？ 3、酶的固定化方法有哪些？ 利用小分子或大分子物质对活性部位