生物化学核酸的结构与功能.ppt

第2章核酸的结构与功能 (常考点:核酸的组成键;DNA双螺旋结构; 各种RNA的特点;核酸的理化性质) （说明：红色字表示是这一节的重点内容） 1、核酸的基本组成单位—核苷酸 （掌握DNA及RNA分子中的碱基种类；掌握戊糖与碱基通过糖苷键相连。） 2、DNA是脱氧核苷酸链 （掌握核苷酸之间通过3/，5 /-磷酸二酯键相连） 3、 RNA是核糖核苷酸链 4、核酸的一级结构 定义 核酸中核苷酸的排列顺序。 由于核苷酸间的差异主要是碱基不同，所以也称为碱基序列。 （说明：红色字表示是这一节的重点内容） 1、DNA的二级结构-双螺旋结构 （掌握Chargaff规则、 DNA 双螺旋结构模型要点。） 2、DNA的高级结构 3、 DNA的功能 亲水性的骨架位于双链的外侧。 疏水性的碱基位于双链的内侧。 （说明：红色字表示是这一节的重点内容） 1、mRNA （掌握hnRNA是mRNA的前体， hnRNA既有内含子又有外显子，mRNA有5/端的帽子及3 /端尾巴，真核生物mRNA是单顺反子） 2、 tRNA （tRNA含有稀有碱基最多，二级三叶草形结构的组成） 3、 rRNA （原核生物核糖体大、小亚基rRNA的种类） 4 、snmRNA （核酶的化学本质是小分子RNA） （说明：红色字表示是这一节的重点内容） 1、核酸的紫外吸收性质 （掌握核酸分子中的碱基可以吸收260nm的紫外光） 2、 DNA的变性 （掌握变性伴随增色效应，同时核酸溶液的黏度下降，Ｔm值与DNA分子G+C含量呈正相关） 3、 复性及杂交 核酸的酸碱及溶解度性质 核酸为多元酸，具有较强的酸性。 核酸的高分子性质 粘度：DNARNA dsDNA ssDNA 第五节 核酸酶（了解） 部分变性DNA的电镜图像 增色效应(hyperchromic effect)：DNA变性时其溶液OD260增高的现象。 DNA解链时的紫外吸收变化 DNA的解链曲线 连续加热DNA的过程中以温度相对于A260值作图，所得的曲线称为解链曲线。 解链过程中，紫外吸光度的变化达到最大变化值的一半时所对应的温度。 解链温度(melting temperature，Tm) G+C 含量越高，解链温度就越高。 解链曲线的变化 三、变性的核酸可以复性或形成杂交双链 当变性条件缓慢地除去后，两条解离的互补链可重新配对，恢复原来的双螺旋结构，这一现象称为DNA复性(renaturation) 。 减色效应：DNA复性时，其溶液OD260降低。 热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，这一过程称为退火(annealing) 。 不同种类的DNA单链分子或RNA分子放在同一溶液中，只要两种单链分子之间存在着一定程度的碱基配对关系，在适宜的条件可以在不同的分子间形成杂化双链(heteroduplex)。 这种杂化双链可以在不同的DNA与DNA之间形成，也可以在DNA和RNA分子间或者RNA与RNA分子间形成。这种现象称为核酸分子杂交。 核酸分子杂交(hybridization) 核酸分子杂交 研究DNA分子中某一种基因的位置。 监定两种核酸分子间的序列相似性。 检测某些专一序列在待检样品中存在与否。 核酸分子杂交的应用 依据底物不同分类 DNA酶(deoxyribonuclease, DNase)： 专一降解DNA。 RNA酶 (ribonuclease, RNase)： 专一降解RNA。 依据切割部位不同 核酸内切酶：分为限制性核酸内切酶和非特异性限制性核酸内切酶。 核酸外切酶：5′→3′或3′→5′核酸外切酶。 核酸酶是指所有可以水解核酸的酶。 信使RNA(messenger RNA, mRNA)是合成蛋白质的模板。 不均一核RNA(hnRNA)含有内含子(intron)和外显子(exon)。 外显子是氨基酸的编码序列，而内含子是非编码序列。 hnRNA经过剪切后成为成熟的mRNA。 一、mRNA是蛋白质合成中的模板 hnRNA 内含子 (intron) mRNA mRNA成熟过程 外显子 (exon) 从AUG 开始，每三个核苷酸为一组编码了一个氨基酸，称为三联体密码(codon)。 成熟的mRNA由氨基酸编码区和非编码区构成。 5?-末端的帽子(cap)结构和3?-末端的多聚A尾(poly-A tail)结构。 成熟的真核生物mRNA 帽子结构:m7GpppGm （一）大部分真核细胞mRNA的5‘末端都以三磷酸双鸟苷为起始结构 真核生物的mRNA 的3?-末端转录后加上一段长短不一的聚腺苷酸。 （二）在真核生物mRNA的3末端有多聚腺苷酸结构 mRNA核内向胞质的转位 mRNA的稳定性维系 翻译起始的调控