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寄生虫病的诊断技术 1.消化道与呼吸道寄生虫病的诊断 2.外寄生虫病的诊断 3.血液寄生虫病的诊断 4.组织内寄生虫病的诊断 直接涂片法:取50%甘油水溶液或普通水1~2滴滴于载玻片上,镊取黄豆大小的被检粪块与之混匀,剔除粗粪渣,抹薄涂匀,盖上盖玻片镜检。本法最为简便,但检出率不高。为提高阳性检出率,每个样本应检多片。适用于虫卵数量多时。 漂浮法:应用比重较虫卵大的漂浮液,使蠕虫卵、球虫卵囊等浮于液体表面,易于集中检查。漂浮集卵法对某些线虫卵、绦虫卵和原虫卵囊有很好的检出效果。缺点是高比重的漂浮液易使虫卵和卵囊变形,检查时必须迅速,也可在制片时补加一滴清水。适用于比重小的虫卵。 沉淀法 :用水处理粪便,经离心或自然沉淀,使虫卵沉淀集中,更易于检查。 适用于比重大的虫卵。 锦纶筛兜淘洗法:适用于宽度大于一定孔径的虫卵 虫卵计数:麦氏计数法,EPG(每克粪便中的虫卵数) 1.漏斗幼虫分离法(贝尔曼法):取粪便15~20克,放在漏斗内的金属筛上,漏斗下接一短橡皮管,管下再接一小试管。 2.粪便培养法:在培养皿底部加滤纸一张,而后将欲培养的粪便加水调成硬糊状,塑成半球形,放于皿内的纸上,并使半球形粪球的顶部略高出平皿边沿,使加盖时与皿盖相接触。将此皿置25℃温箱中,注意保持皿内湿度(应使底部的垫纸保持潮湿状态)。经7天后,多数虫卵即可发育成第三期幼虫,并集中于皿盖上的水滴中。将幼虫吸出置载玻片上,放显微镜下检查。 3.毛蚴孵化法:日本血吸虫 (3) 粪便内原虫检查方法 球虫卵囊检查法,同前1粪便检查。 隐孢子虫检查:特殊染色沙黄-美蓝染色。 结肠小袋纤毛虫:苏木素或碘特殊染色。 二、血液寄生虫病诊断 1.蠕虫幼虫的检查(如丝虫目线虫的幼虫) ? 1.1直接镜检法(幼虫多时) ? 1.2溶血染色法(幼虫少时) 方法是采血于离心管中。加入5%醋酸溶液以溶血。待溶血完成后,离心并吸取沉淀检查。 2.血液原虫检查 ? 2.1直接镜检法:采动物末梢血,将采出的血液滴在洁净的载玻片上,加等量的生理盐水与之混合,覆以盖玻片,立即放显微镜下用低倍镜检查,发现有运动的可疑虫体时,可再换高倍镜检查。由于虫体未染色,检查时应使视野中的光线弱些。 ? 2.2涂片染色法: 2.3离心集虫法: 血液中的虫体较少时 离心集虫法 其操作过程是,采病畜抗凝血6~7毫升,以每分钟500转的速度,离心5分钟,使其中大部分红细胞沉降;而后将含有少量红细胞,白细胞和虫体的上层血浆移入另一离心管中,补加一些生理盐水,以每分钟2500转的速度离心10分钟。取沉淀物制成抹片,按上述染色法染色检查。此法适用于伊氏锥虫病和梨形虫病。 其原理是锥虫和感染有梨形虫的红细胞较正常红细胞的比重为轻,所以在第一次沉淀时,正常红细胞下降,而锥虫和感染有梨形虫的红细胞尚悬浮在血浆中。第二次离心沉淀时,则将其浓集于管底。 三、组织或组织液内寄生虫病诊断 淋巴结穿刺、染色检查(泰勒虫柯赫氏蓝体) 取腹水抹片、染色检查(适用于弓形虫病) 生殖道原体检查法: 寄生于生殖道的虫体主要有牛胎儿三毛滴虫和马媾疫锥虫。 牛胎儿毛滴虫存在于病母牛的阴道与子宫的分泌物、流产胎儿的羊水、羊膜或其第四胃内容物中,也存在于公牛的包皮鞘内,应采取以上各处的病料寻找虫体。 组织或组织液内寄生虫病诊断 1.淋巴结穿刺、染色检查(泰勒虫柯赫氏蓝体) 2.取腹水抹片、染色检查(适用于弓形虫病) 3.生殖道原体检查法: 寄生于生殖道的虫体主要有牛胎儿三毛滴虫和马媾疫锥虫。 牛胎儿毛滴虫存在于病母牛的阴道与子宫的分泌物、流产胎儿的羊水、羊膜或其第四胃内容物中,也存在于公牛的包皮鞘内,应采取以上各处的病料寻找虫体。 外寄生虫病的诊断-病料的采集 寄生于动物体表的寄生虫主要有蜱、螨、虱等。对于它们的检查,可采用肉眼观察和显微镜观察相结合的方法。 蜱寄生于动物体表,个体较大,通过肉眼观察即可发现。 螨和虱有些个体较小,常需刮取皮屑,于显微镜下寻找虫体或卵。 刮取皮屑的方法甚为重要,应选择患病皮肤与健康皮肤交界处,这里的螨较多。刮取时先剪毛,取凸刃小刀,在酒精灯上消毒,使刀刃与皮肤表面垂直,刮取皮屑,直到皮肤轻微出血(此点对检查寄生于皮内的疥螨尤为重要)。 在野外进行工作时,为了避免风将刮下的皮屑吹去,可根据所采用的检查方法的不同,在刀上先蘸一些水或5%的甘油溶液,这样,可使皮屑粘附在刀上。将刮下的皮屑集中于培养皿或试管内,带回供检查。 蠕形螨病,可用力挤压病变部,挤出脓液,将脓液摊于载玻片上供检查。 驱虫药的选择与应用 1.选择:安全、高效、广谱、使用方便、价格低廉。
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