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现代环境测试技术实验讲义 周家斌 武汉理工大学资源与环境工程学院 实验一 气相色谱－质谱（GC-MS）一实验目的： 1了解GC-MS仪的基本构造，熟悉工作站软件的使用； 2了解运用GC-MS仪分析样品的基本过程，掌握利用质谱标准图库检索进行色谱峰定性。 二实验原理： 本实验使用的质谱检测器采用电子电离源（EI），它的灯丝能发射出能量为70ev的电子束。从毛细管色谱柱流出的气体样品进入检测器后，被电子电离，生成的分子碎片经加速器加速后进入四极杆质量分析器进行分析。 三仪器和试剂： Agilent 5973N 型色谱质谱仪（安捷伦科技有限公司）；10 ul微量注射器；针式过滤器（有机相）本实验分离分析的是混合物，溶剂（色谱纯） 四实验步骤： 以为溶剂，配制合适浓度的混合溶液； 使用0.45μm的有机相微孔膜过滤器将混合溶液过滤至样品瓶中； GC-MS参数载气流速：N2，0.5ml·min-1；进样量：μl；设置样品信息及数据文件保存路径后，按下“Start run”键，待“Pre-run”结束，系统提示可以进样时，使用10μl进样针准确吸取μl样品溶液（不能有气泡）。将进样针插入进样口底部，快速推出溶液并迅速按下色谱仪操作面板上的“start”按钮，分析开始。 对得到的总离子流色谱图（TIC），在不同保留时间处双击鼠标右键得相应的质谱图，在质谱库中检索后，根据匹配度、置信度可确定各峰的归属。 五实验结果与讨论： 1样品的总离子流色谱图，）给出色谱峰定性结果（含质谱检索结果、物质名称、保留时间）。 2某一保留时间处的质谱图，分析它们主要产生了哪些离子峰。质谱电离过程中分子碎裂的机理，写出子碎裂过程。 3 六思考题 ．GC-MS适用于分析哪些样品，请举例说明。 实验二 高效液相色谱法（）实验目的：1．理解液相色谱的原理与应用 2．掌握用保留值定性及用标准曲线法进行定量的方法 实验原理： 高效液相色谱法(HPLC)是由经典液相色谱（柱层析、纸层析、薄层层析）发展起来的，采用高压液体作流动相并采用了新型固定相和连续自动检测系统，从而大大提高了理论塔板数，具有快速、高效等特点。它克服了气相色谱法要求样品挥发性大、热稳定性好的局限，特别适用于大分子量的高分子化合物及离子型化合物的分离与分析。HPLC按分离原理可分为吸附色谱、键合相色谱、离子交换色谱和凝胶排组色谱。 在以上四种分离方式中，反相键合相色谱应用最广，因为它采用醇-水或腈-水系作流动相。纯水易得廉价，它的紫外吸收极小。在纯水中添加各种物质可改变流动相的选择性。使用最广泛的反相键合相是十八烷基键合相，即让十八烷基（C18H37—）键合到硅胶表面，这种键合相又称ODS(Octadecylsily) 键合相。 本次实验采用反相液相色谱进行分离，以检测器进行检测，以标准系列溶液的色谱峰面积对其浓度做工作曲线，再根据样品中的的峰面积，由工作曲线算出其浓度。三、 仪器与试剂仪器Agilent 1100 HPLC (美国Agilent公司)，HP工作站，ODS柱，5μL定量环50ul微量注射器。 试剂1．甲醇（色谱纯），二次蒸馏水 2标准储备溶液 四、 实验步骤1．按操作指南开启仪器, 使Agilent 1100 HPLC色谱仪正常工作，色谱条件为： 柱温：25℃流动相：甲醇：水=80：20实验结果与讨论：A（mVs）与其浓度(mg/L)的标准曲线。 2．根据样品中正十六烷酸色谱峰的峰面积，由标准曲线计算样品中正十六烷酸含量。 六、 思考题 1．用标准曲线法定量的优缺点是什么？ 2．为什么改变流动相配比可以改变分离状况？ 附Agilent 1100高效液相色谱μl/mL的Cu2+用蒸馏水稀释至刻度。在相同条件下测量同一元素的吸光度，绘图，由图中查得试液中铜的含量。这种方法亦称“直接外推法”。 也可以用计算方法求得试液中待测元素的浓度。 设试样中待测元素的浓度为Cx，测得其吸光度为Ax，试样溶液中加入的标准溶液浓度Co，在此溶液中待测元素的总浓度Cx+Co；测得其吸光度为Ao，根据比尔定律 Ax=KCx Ao=K（Co+Cx） 将上面两式相比 标准加入法也可以用来检验分析结果的可靠性 三 仪器与试剂 1 仪器 ZENNIT700P 型原子吸收光谱仪、空压机、铜空心阴极灯、移液管（50ml）、容量瓶（100ml） 2 试剂 盐酸（优级纯）（1+1）、硝酸（优级纯）（1+1）、铜标液（1000ppm）、样品主元素溶液 四 实验步骤 1 样品处理 准确称取0.5~1克样品加入10ml（1+1）HCl或者10ml(1+1)HNO3，加热溶解，定容100ml容量瓶中，同时处理空白。 2 标准系列配制 先配100μg/ml过渡液，在接取过渡液1 2 3 4ml于容量瓶中，加入相应量金属材