检验检测项目测定方法教程分析.pptVIP

离子选择电极法 溶液中被测离子接触电极时，在离子选择电极膜基质的含水层内发生离子迁移，迁移离子的电荷改变存在着电势，产生了跨膜电位，在测量电极与参比电极之间产生一个电位差。这种电位变化由离子活度决定，并与离子浓度成比例。 常规检测项目的测定方法 主讲人：杨敏 * 分类 固定时间法 终点法 一点终点法 连续监测法 两点终点法 免疫比浊法 离子选择电极法 一点终点法 即在时间-吸光度曲线上吸光度不再改变时，选择一个时间点测定吸光度值。 通常在反应终点附近连续读两个吸光度，求出两点的平均值，并根据两点的差值判断反应是否达到平衡。 多用于GLU TG CH等的测定。 * * Al T （时间） A S+R (吸光度） 一点终点法反应曲线 二点终点法 第二试剂加入以前，选择某一点读取吸光度Am，经过一定时间后反应达终点后测第二个吸光度值An,利用两吸光度之差计算结果。 第一点吸光度值由样本本身或第一试剂与样品的非特异性反应有关，相当于样品空白，可有效的消除样品自身的吸光度，如溶血，黄疸，脂血等的干扰。 * * An T A R2 Am S+R1 (吸光度） （时间） 两点终点 Ax= 样本空白 An - k0 Am （体积校正因子）k0 = Sv+Rl Sv+R1+R2 固定时间法 指在时间-吸光度曲线上选择两个测光点，这两点既非反应初始吸光度亦非终点吸光度，利用这两点吸光度差值计算结果。 如：苦味酸法测肌酐 固定时间法 计算公式： C=(A2-A1)*K · ● ● A1 A2 T (吸光度） 免疫比浊法 通过物质对光的散射或透射来测定物质含量的方法： 散射比浊：特定蛋白分析仪 透射比浊：自动生化分析仪 通常作两点终点法分析，多采用多点校准。 应用：用Ab测定Ag（主要为微量蛋白：IG、 APOA1/B、ASO、RF、CRP等），要求Ab 过量，此时Ag-Ab复合物的生成量随Ag的增加而递增，光散/透射射强度与抗原量成正比。 连续监测法 根据反应速度与待测物的浓度成正比，通过测定一段时间内吸光度的变化速率（ △A/min ）来计算待测物的浓度。 酶活性测定常用 酶促反应曲线 临床举例 1.终点法： 总胆红素及结合胆红素（氧化法或重氮法）、 血清总蛋白（双缩脲法）、 血清白蛋白（溴甲酚氯法）、 总胆汁酸（酶法）、 葡萄糖、总胆固醇、甘油三酯（氧化酶法） 尿酸（尿酸酶法）、 高密度脂蛋白胆固醇（直接测定法） 钙（偶氮砷Ⅲ法） 磷（紫外法） 镁（二甲苯胺蓝法） 2．固定时间法　肌酐（苦味酸法） 3．连续监测法　ALT、AST、LDH、ALP、GGT、AMY、CK 4．透射比浊法　 载脂蛋白、免疫球蛋白、补体、抗“O”、类风湿因子，以及血清中的其他蛋白质如前白蛋白、结合珠蛋白、转铁蛋白等。 5、离子选择电极法 Na+ CL- K+ *