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吸烟有害健康又有新证据 精选 已有 1888 次阅读 2012-6-7 16:35 |个人分类:研究生培养|系统分类:科研笔记|关键词:健康 office style Nature Medicine》发表来自山东大学泰山学者和美国学者联合的研究表明，尼古丁可以通过MAPK2(促进动脉瘤形成，给这一观点提供了分子水平上的证据。 腹主动脉瘤主要发生于60岁以上的老年人群，常伴有高血压病和心脏疾病，但年轻人也偶尔可见，男性多于女性。该病犹如体内的一颗定时炸弹，一旦破裂，死亡率高达50%-80%。 腹主动脉瘤是动脉瘤最常见的类型。在美国，腹主动脉瘤破裂是第13位死亡原因，腹主动脉瘤的具体原因目前仍不清楚。在目前已经确定的各类危险因子中，吸烟可增加腹主动脉瘤发生几率7.6倍，是唯一一种非常确认的和腹主动脉瘤形成、扩张和破裂相关的因素。但是，目前人们对吸烟引起腹主动脉瘤的具体分子机制仍不十分清楚。（该疾病的重要性，吸烟的危害性，存在的问题是不清楚机制） 从病理学角度考虑，腹主动脉瘤的典型特征是由于弹性蛋白丢失、平滑肌细胞凋亡和胶原蛋白补偿性沉积引起的各层动脉壁扩张。活性氧被认为是联系炎症、基质降解和腹主动脉瘤病理生理学过程的共同因子。例如，动物实验结果表明，血管紧张素II可增加NADPH氧化酶产生活性氧，诱导MMP基因和蛋白表达，诱导炎症介导的腹主动脉瘤形成。尽管活性氧增加是腹主动脉瘤的重要因素，但活性氧诱导腹主动脉瘤的分子机制仍不十分清楚。 AMPK是一种丝/苏氨酸激酶，由α, β和γ三个亚单位组成，α亚单位有α1和α2两钟类型，属于催化亚单位；β和γ亚单位属于调节亚单位。AMPK可被细胞内AMP或ADP激活，被认为是细胞内能量感受器，对肌体能量代谢中发挥重要调节作用。最近有学者发现，缺氧或氧化剂，包括过氧化氢和亚硝酸阴离子，可以通过LKB1或非LKB1途径激活AMPK。因此，在血管平滑肌中氧化剂介导的AMPK激活在血管紧张素II注射和插线损伤中可抑制细胞增殖和再狭窄。但是，AMPK是否参与腹主动脉瘤的形成仍不清楚。本研究报道香烟主要成分尼古丁可激活血管平滑肌中AMPK，导致MMP2特异性表达和腹主动脉瘤形成。 研究结果： AMPK2(丢失后可阻断尼古丁诱导Ape基因敲除动物腹主动脉瘤形成。研究结果提示AMPK2(是尼古丁诱导Ape基因敲除动物腹主动脉瘤形成的关键分子。结果中发现AMPK1(不具有该效应，说明AMPK2(是特异性分子。 这个研究内容中作者使用了三种动物：Ape基因敲除、Ape基因AMPK1(基因联合敲除、Ape基因AMPK2(基因联合敲除，所有动物分尼古丁处理和对照两组。使用了大体动脉照片、腹主动脉瘤产生几率、最大动脉瘤直径、动脉体重比例、HE, elastin and α-actin 典型染色。 二、AMPK2(丢失后可阻断尼古丁诱导Ape基因敲除动物腹主动脉瘤形成。采用上述同样的研究设计和指标，证明用血管紧张素II注射获得类似的结果。增加血压和代谢指标的检测。除血压有影响外，其他没有任何改变。 三、尼古丁和血管紧张素II可以使所有动物的发生氧化应激和炎症反应。氧化应激测定动脉组织中MDA和3-NT，炎症因子检测了血清中的炎症因子。这个结果提示，尽管尼古丁和血管紧张素II可以使动物发生氧化应激和炎症反应，但AMPK2(丢失动物不发生动脉瘤。暗示AMPK2(是氧化和炎症的执行分子。 四、骨髓来源细胞中AMPK2(基因不影响尼古丁或血管紧张素II诱导的动脉瘤形成。因巨噬细胞中AMPK1(为主，提示巨噬细胞在动脉瘤发生中不发挥作用。作者先将动物放射处理后分别移植AMPK1(或AMPK2(基因敲除动物的骨髓。结果发现，动物发生动脉瘤和骨髓来源的细胞是否有AMPK1(或AMPK2(无关，只和非骨髓细胞是否有AMPK2(有关。这个结果说明，骨髓来源的细胞中AMPK2(不影响尼古丁或血管紧张素II诱导的动脉瘤形成。这个结果提示，该基因发挥作用可能是在平滑肌细胞。（当然不能绝对）为进一步严整平滑肌细胞的重要性，作者检测了尼古丁或血管紧张素II诱导动物的MMP2水平，结果发现后者水平增加，使用MMP2 siRNA干扰将MMP2基因表达取消，则动物动脉平滑肌中MMP2的底物胶原酶IV含量下降，弹性蛋白酶降解被逆转。 五、细胞学研究证明，尼古丁可以剂量依赖性激或血管平滑肌细胞MMP2基因表达和酶活性，也可以促进AMPK2(磷酸化激活。当然有各类激活物、抑制剂、亚硝酸阴离子、血管紧张素II等的阳性对照，以及AMPK1( 和AMPK2( siRNA，结果证明AMPK2(是引起MMP2基因表达和酶活性的关键分子。这里采用逆转PCR（为什么没有用定量？）、western和酶活性电泳。 六、尼古丁诱导MMP2的效应依赖AP-2(转录活性。 因为A