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发酵工程
课程设计说明书
年产10万吨乳酸发酵工艺设计
学生姓名: 学号:
学 院:
专 业:
指导教师:
2013年 12月
目 录
1 引言 1
1.1乳酸的性质及其应用 1
1.1.1乳酸性质 1
1.1.2乳酸在各行业中的应用 1
1.1.3微生物发酵法生产乳酸 2
1.1.4国内外乳酸生产概况及市场前景分析 2
1.2细菌发酵生产乳酸研究进展 2
1.2.1乳酸细菌简介及其营养需求 2
1.2.2乳酸细菌发酵培养基的改进和优化 4
2 乳酸的制备 6
2.1菌种选育 6
2.1.1菌种的选择性分离 6
2.1.2诱变育种的基本原理 7
2.2菌种保藏 7
2.3设计培养基 7
2.3.1培养基配置的原则 7
2.3.2德氏乳杆菌的培养基及培养条件 8
2.4灭菌 8
2.4.1仪器灭菌 9
2.4.2培养基灭菌 9
2.5种子扩大培养 10
2.5.1实验室种子制备 11
2.5.2生产车间种子制备 11
2.5.3影响种子质量的因素 11
2.6发酵过程及工艺控制 11
2.6.1发酵过程技术原理 11
2.6.2发酵过程的补料策略 11
2.6.3发酵影响因素 12
2.6.4发酵终点判断 13
3 工艺计算 15
3.1物料衡算 15
3.1.1发酵罐 15
3.1.2发酵液物料衡算 16
3.1.3种子罐计算及种子培养基组分计算 17
4 下游加工过程 20
4.1发酵液的预处理和固液分离 20
4.2乳酸的提取 20
4.3乳酸结晶 20
5 设计总结 22
6 设计体会 23
参考文献 24
1 引言
1.1 乳酸的性质及其应用
? 保加利亚乳杆菌属于化能异养型微生物,营养要求苛刻。一般来说,脱脂乳和乳清是乳酸菌的最佳培养基,实验表明,单从菌落总数来说,以乳清加6%脱脂奶粉作为培养基最好,生长繁殖过程中需要多种微生素等生长因子,尤其是B族维生素,如吡哆酸、钴胺酸、叶酸等。最适生长温度一般为37~45℃。温度高于50℃或低于20℃则不能生长。
? 在培养中,保加利亚乳杆菌对碳源、氮源也是有要求的,酵母膏是实验室常用的一种化学试剂,其中尼克酸、叶酸、钴胺酸含量较高,在中性及微酸性环境中对热稳定,故酵母膏作为碳源、氮源对保加利亚乳杆菌有较显著的促进作用。另外,培养中缓冲盐也很重要,如CaCO3可以中和保加利亚乳杆菌代谢过程中产生的大量乳酸,解除代谢产物乳酸对菌体生长的抑制作用。
?
一般来说,保加利亚乳杆菌耐受乳酸的最大量为2%,理论上乳酸菌经同型发酵途径每消耗1mol葡萄糖会转化生成2mol乳酸和2mol ATP,若产生2%乳酸需要消耗约2%葡萄糖,而总糖消耗量应为3%~4%或略高才能满足保加利亚乳杆菌的营养要求。
? 该菌是乳酸菌中产酸能力最强的菌种,最高产酸量2%,能利用葡萄糖、果糖、乳糖进行同型乳酸发酵产生D型乳酸(有酸涩味,适口性差),发酵可产生香味物质。对热的耐受性差,但个别菌株在75℃条件下能耐受20min。在乳中,该菌显示温和的蛋白分解性和较弱地脂肪松懈性,对碳酸盐比较敏感。能产生称做保加利亚菌素的抗生素。
1.2.2 乳酸细菌发酵培养基的改进和优化
发酵培养基一般应包含有足够的碳源、氮源、无机盐和水,某些合成能力差的 微生物还需添加适当的生长辅助类物质,才能维持其正常的生长。
碳源
目前乳酸生产多以玉米、小麦、大米、红薯等淀粉原料进行液化糖化后作为碳 源,但这些淀粉质原料成本相对较高。研究者们更多地把目光放在了农林废弃物、 食品加工废弃物等廉价原料上,努力变废为宝。农林废弃物中含有大量的纤维素、半纤维素和木质素,是最丰富的可再生物质,其中可用的主要原料有麦糠、麸皮、 农作物秸秆等 Nakasaki等用纤维素酶水解含有纤维素和半纤维素的造纸污泥,并 将从活性污泥分离得到的乳酸细菌用于发酵,其乳酸产量为 6.91 g/L,产率为90%。 Ruengruglikit等将玉米芯经氢氧化钠预处理后进行发酵,48h得到乳酸产率约为 300 g/kg。用于发酵乳酸的食品加工废弃物主要成分为淀粉和糖类,主要包括玉米加工废 水、土豆加工废水、糖蜜废水和甜菜叶、茎及厨房垃圾等。Jin等选用了土豆淀粉 废水和玉米淀粉废水作为生产培养基,发酵后相应得率为 0.85~0.96 g/g。Wang等将垃圾存放 24 小时后经乳酸菌发酵生成乳酸,发酵 96 小时后,发现大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和蜡状芽孢杆菌均消失,该
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