专题微生物的培养与应用分析报告.ppt

专题2 微生物的培养与应用 一、微生物的培养与应用 1.微生物的实验室培养 (1)培养基 ①概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求, 配制出供其生长繁殖的营养基质。 ②分类 a．按培养基的物理性质可以分为液体培养基 和固体培养基。 b．按培养基的用途可以分为选择培养基和鉴 别培养基。 划分 标准 培养基种类 特点 物理 性质 液体培养基 不加凝固剂 固体培养基 加凝固剂， 如琼脂 用 途 选择培养基 培养基中加入某种化学物质，用来抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长 培养和分离出特定微生物(如分离酵母菌和霉菌，可以在培养基中加入青霉素) 鉴别培养基 根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品 鉴别不同种类的微生物，如用伊红——美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否含有大肠杆菌(若有，则菌落呈深紫色并带有金属光泽) 【特别提醒】 选择培养基一般只生长具有特定目的的微生物，鉴别培养基可以存在其他微生物，而且能鉴别特定的微生物。 ③培养基配方及营养要素 基本营养要素：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐。此外还要满足不同微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求。 无菌技术主要操作要求 a．实验前应对操作空间、操作人员消毒，对所用器具和培养基灭菌。 b．实验进行时需在酒精灯火焰周围无菌区操作，另外要避免已灭菌处理材料再次污染。 (2)无菌技术 （1）消毒和灭菌的区别 用酒精消毒时，70%的酒精杀菌效果最好， 原因是：浓度过高，使菌体表面蛋白质凝固成一层保 护膜，乙醇分子不能渗入其中； 浓度过低，杀菌力减弱。 2．纯化大肠杆菌以及菌种的保藏 (1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基： 计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。 【友情提醒】平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的温度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发；又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 (2)纯化大肠杆菌 ①原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。 (2)纯化大肠杆菌 平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面； 稀释涂布平板法:将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 （2）接种操作: 第一步:灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微 生物污染培养基； 每次划线前:灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后， 接种环上残留的菌种，使下一次划线时， 接种环上的菌种直接来源于上次划线的末 端，从而通过划线次数的增加，使每次划 线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落 划线结束后:灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的 菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 (3)菌种的保藏 ①短期保存：固体斜面培养基上4 ℃保存，菌种 易被污染或产生变异。 ②长期保存：－20 ℃甘油管在冷冻箱中保藏。 【例1】分析下面培养基的配方：KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂。请回答： (1)在该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是________和________。 (2)想一想这种培养基对微生物是否具有选择作用？如果具有，又是如何进行选择的？ ____________________________________________。 (3)培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌及消毒方法依次是(　　) ①化学消毒　②灼烧灭菌　③干热灭菌　④紫外线灭菌　⑤高压蒸汽灭菌　⑥巴氏消毒法