2染色体和DNA345--复制.ppt

2.3 DNA的复制 2.3.1 DNA的半保留复制机理 1、半保留复制的模型和验证 模型假设：有三种可能 半保留模型（semioconservetive model） 全保留复制模型(conservetive model) 分散模型(Dispersive model)。 验证半保留复制的实验 1958年Meselson-Stahl实验 2.3.2 复制的起点方向和速度 复制结构---复制叉 复制子（replicon) 通常把生物体的复制单位称为---- 复制的方向---单向、双向 1、 E.coli定点、双向对称复制。 2、T7在近一端的17％处开始，向两端延伸。 3、枯草杆菌有固定的起始点，双向不对称复制。 4、质粒R6K早期为单向复制，复制了约1/5基因组进行时双向复制。 5、质粒Col E1有固定起始点，但却为单向复制。 6、mt DNA进行D（displaced loop）环复制? 7、真核有多个复制起点（i），双向等速复制。 2.3.3 复制的几种主要方式 虽然DNA 均以半保留进行复制，但因DNA在细胞内的存在形式不同，复制叉部位复制方式也不同。 主要有： 1、线性双链DNA 2、环状双链DNA 2.3.3.1 线性DNA双链的复制 线性DNA的末端序列的合成，可能是完全独立的过程。 目前有4种假设： 1、线性DNA的转变为环形。 2、线性DNA的末端形成发夹结构。 3、末端加头或接尾。 4、与蛋白质结合引发合成。 举例：腺病毒DNA的复制 腺病毒DNA全长35937 bp线性双链，两端各有反向重复顺序103～162 bp，两末端各有50 bp为复制起点。 其复制是以单链置换（strand displacement）形成一个大的茎环或叫平锅形结构来进行的。 腺病毒新DNA链合成---蛋白质引物 2.3.3.2 环状DNA双链复制 依环型DNA的复制过程中间物结构 有3种： 1、θ型复制 2、滚环式复制（δ型复制） 3、D型复制 1、θ型复制模式—双向复制 2、滚环复制模型 1968年Gilbert提出，要点 （1）共价延伸； （2）模板链和新合成的链 分开; （3）不需RNA引物，在正 链3‘－OH上延 （4）只有一个复制叉; （5）形成多联（concatemer ）; 滚环复制的电镜照片 。 3、D环复制模式 单向复制一种特殊形式 三种DNA复制的特征对比 中间物结构 模板 方向 1、θ型复制 θ型 双链环状分子两条链 双向 2、δ型复制 δ型 双链环状分子一条链 单向 3、D型复制 D型 双链环状分子两条链 单向 2.4 原核生物和真核生物 DNA复制的特点 2.4.1 原核生物DNA复制的特点 以大肠杆菌基因组DNA复制为例： 基因组DNA为双链双向θ型等速复制 E.coli双链复制的起始 1、主要发生oriC区域。 2、在oriC序列上(245bp)进行复制起始，由形成引发复合物开始，需要6种蛋白质装配成复合物，使环状超螺旋摸板转变为双链广泛解旋的形式。反应是在9kb和13kb的重复序列上。 3、DnaA首先结合在oriC序列的4个9kb重复序列上。然后 DnaA作用于3个13kb重复序列，使这几个位点的DNA融化解链，形成开放复合物。 4、前引发复合物能是DNA oriC区域解链约60bp，在 oriC区域终止，并引发一段RNA引物。 复 制 起 始 点 解 链 复制起始区的结构特点 （1）富含A－T，这可能和双链易于解开起始复制有关； （2）含有多个回文结构（9－14个GATC） 8个GATC较保守,CATC中的“ A”已甲基化; （3）具有 4个反向重复顺序，作为蛋白结合位点； （4）此顺序的右侧毗邻区域有两个启动子，其可能的作用是：①转录产生引物；②产生复制必要的蛋白；③产生调节功能的RNA；④起转录激活作用。 2.4.1.1 DNA双螺旋的解链 复制时，DNA双链解开形成复制叉。此过程有许多蛋白质和酶参与完成。 重要的酶和蛋白质有： （1）单链结合蛋白（SSB） （2）DNA解链酶（DNA helicase) （3）DNA拓扑异构酶(DNA topoisomerase) 单链结合蛋白SSB （