免疫实验室基础常识.ppt

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免疫实验室基础常识 免疫学检测方法的简介基本原理 免疫学检测方法的应用 抗原、抗体的定义 免疫室检测的项目 感染性疾病检查项目 细胞、体液免疫检查项目 肿瘤标志物电化学发光检测项目 自身免疫性疾病检查项目 免疫学检测方法的简介 方法 原理 免疫间接凝集方法 RBC、乳胶颗粒+Ag 免疫 沉淀反应方法 琼脂板+Ab 酶免疫分析技术(EIA) HRP+Ag或Ab 放射免疫方法(RIA) I*125+Ag或Ab 免疫光散射比浊分析 Ag+Ab=CIC、微粒+Ag 免疫胶体金检测方法 胶体金+抗人IgG 免疫荧光显微镜方法 FITC+抗人IgG 化学发光免疫分析技术 ABEL+抗CEA 电化学发光免疫分析技术[Ru(bpy)3]** +抗AFP 免疫学检测常用的基本技术 凝集方法 MP-IgM、TPPA、Widal、Weil-F ASO、RF、CRP、冷凝集实验等 沉淀方法 IgG、A、M、C3、C4、CRP、等 酶联方法 病毒抗体IgG、IgM及蛋白抗原 放射方法 肿瘤标志物等 光散射比浊方法 Ig、ASO、RF、微量蛋白 胶体金方法 TB-Ab、HBsAg、HCG、LP-IgM 荧光显微方法 自身抗体、呼吸道V-IgM等 化学发光技术 肿瘤标志、甲状腺功能、 电化学发光技术 肝炎标志、性腺分析等 免疫学检测常用的基本技术 现代常用的免疫方法 酶免疫分析、荧光免疫分析、光散射比浊分析、化学发光技术、电化学发光免疫分析技术、仪器方法。还有凝集、沉淀、金标记等方法。性激素、细胞因子、肿瘤标志、免疫球蛋白等,都为标准曲线定量方法。以上检测都可视为抗原抗体反应的方法。抗原抗体的内容、免疫的基本概念还需复习一下,以便更充分了解免疫实验检测的基本原理。 抗原与抗体 一.??? 抗原、抗体的定义[1] 1.?????? 抗原的定义 (1) 凡是能够刺激机体免疫系统产生抗体的免疫物质、并能在体内外与抗体发生特异性结合反应的物质称为抗原。 (2)抗原指能与T细胞的TCR何B细胞的BCR结合,促使其增殖、分化、产生抗体或致敏淋巴细胞,并能与之结合,发挥免疫效应的物质。 (3)抗原两个特性:免疫原性、抗原性。 2.?????? 医学上重要的抗原[2] a.???? 病原微生物:细菌、病毒、立克次氏体。(表面抗原、核心抗原、鞭毛抗原等) 抗原与抗体 a.???? 自身抗原: 一般自身组织对机体自身没有抗原性,但在外伤、感染、电离辐射、药物等影响下可以发生变性成为自身抗原,刺激机体产生免疫反应引起自身免疫性疾病,ANA.dsDNA等。 a.肿瘤抗原:如AFP、CEA、PSA等。 b.同种异体抗原:红细胞血型抗原、白细胞抗原(人类白细胞抗原又称HLA)等等。 2 抗体的定义: (1) 抗体是机体在抗原物质刺激下所形成的一类具有与抗原发生特异性结合反应的球蛋白。 (2)抗体是介导体液免疫的重要分子,是指B细胞识别抗原后增殖分化为浆细胞所产生的一种蛋白质,主要存在于血清等体液中。能与抗原特异性结合,具有免疫功能。 (3) 抗原与抗体 l???????? 抗体产生的一般规律 抗原刺激机体后可产生免疫球胆白G、A、M。一般2-3周后才有抗体产生,其出现顺序;IgM最早,但消失也快,在血液中只维持数周至数月。(所以临床检测IgM抗体利于早期诊断)IgG出现稍迟于IgM,当IgM接近消失时,IgG达高峰阶段,它在血液维持时间较长可达数年之久。IgA继IgM和IgG后出现。 抗体的基本内容 用电泳的方法可将血清或血浆蛋白分离成白蛋白和球蛋白两个组分。大多数抗体位于r球蛋白区域内。抗体的另一个常用名为免疫球蛋白(Ig),意为r球蛋白中与免疫相关的组分。 抗体在血液中检出,但它在其他部位存在;细胞质内质网和高尔基体的膜和B淋巴细胞膜上、NK细胞和肥大细胞的细胞膜上、组织液和血浆中、还在乳汁和分泌液中。 抗体分类;IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。 IgG亚类IgG1-4、IgA亚类1-2 抗体的基本内容 抗体的功能 对有害因子,如毒素、药物、病毒、细菌、和其它寄生虫可通过与特出细胞受体结合而造成机体的损害,而分泌抗体可通过与其结合了阻止与响应受体结合,起到了中和作用。 IgG的调理作用促进吞噬细胞对抗原的吞噬。 IgG、IgE和IgM介导的抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用。(NC、MC、NK细胞) IgE所介导的超敏反应 IgA介导的粘膜免疫 母体的IgG介导的新生儿免疫 应用抗原抗体结合原理检测的项目 感染性疾病检测项目 肝炎病毒筛查:A、B、C、D、E、G、TTV、CMV 呼吸道病原体筛查:

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