分子生物技术问答题农大期末考试复习题.docVIP

试比较DNA复制与转录的异同点。 相同点：都以DNA链作为模板，合成的方向均为5’→3’，聚合反应均遵从碱基配对原则，核苷酸之间形成磷酸二酯键使核苷酸链延伸。不同点： 复制 转录 模板 两股链均复制，全部信息 模板链，部分信息 原料 dNTP NTP 酶 DNA聚合酶 RNA聚合酶 产物 子代双链DNA（半保留复制） mRNA，tRNA，rRNA 引物 RNA引物 无 配对 G-C; T-A A-U; T-A; C-G 简述真核与原核基因转录方面存在的差异。 原核生物 真核生物 RNA聚合酶 只有1种。 3种，分别转录不同的RNA mRNA结构 通常5‘帽子和3’尾巴 顺反子 功能相近的基因通常形成一个操纵子，由共同的调控区进行转录调控。 转录起始 不同的聚合酶有不同的启动子调控 转录终止 在RNA水平发生作用：不依赖ρ因子的终止子在柄部富含GC碱基对，而且连接一串富含U的茎环结构；依赖于ρ因子的终止子通过ρ因子与β亚基的作用促使转录终止。 3类RNA聚合酶的转录因子都需要富含AT的序列。 简述RNA的种类及其生物学作用。 比较真核生物和原核生物mRNA的异同。 原核生物和真核生物mRNA的差别在于可翻译顺反子的数目，真核生物的mRNA是单顺反子。而且真核生物的mRNA在其3’末端有多聚腺苷酸尾巴（polyA），而5’末端有7－甲基鸟嘌呤帽子。真核生物的mRNA尾部区域有时会携带特定的去稳定因子。 简述真核生物mRNA基因的转录过程。 1) 模板识别：RNA聚合酶与双链DNA的启动子开始结合；DNA双链被分开；形成转录泡。 2) 转录的起始：RNA中第一个核苷酸键合成；合成前9 个核苷酸键时，酶仍旧位于启动子上；聚合酶成功地完成了RNA链的延伸并离开启动子。 3) 延伸阶段：延伸阶段包括DNA 结构的改变带来的转录泡前移。在转录泡中，模板链的瞬间解旋区与新生的RNA 链在延伸点发生配对。 RNA聚合酶沿DNA移动，RNA链逐渐延长，酶一边移动一边将DNA解螺旋，使一段新的模板以单链形式暴露出来。核苷酸以共价键形式被添加到RNA链的3’末端，在解旋区形成一个RNA-DNA 杂交链。解旋区之后的DNA 模板链又与另一条单链DNA 配对并形成双螺旋。RNA 形成游离的单链。 4) 转录的终止：包括对那些不再被加到RNA上的碱基位点进行识别。磷酸二酯键停止形成，转录复合体分离，转录终止。当最后一个碱基加入到RNA 链上，转录泡崩解，RNA-DNA杂交被破坏，DNA重新形成双螺旋，聚合酶和RNA都释放下来。 简要说明真核生物mRNA 的结构特点。 真核生物转录的前体RNA如何加工为成熟的mRNA ? 1) 5’端加帽子。5’加帽是一个多步加工过程，第一步是鸟苷转移酶将一个鸟苷酸加在5’RNA的前端，产生5’-5’对接的磷酸二酯键。第二步由鸟嘌呤甲基转移酶将一个甲基基团加到嘌呤环的7位氮原子使5’帽子鸟嘌呤转变为7-甲基鸟嘌呤。 2) 3’端加poly(A)尾巴。在切除前体mRNA 3末端的一段序列后，在poly (A) 多聚酶作用下，合成再加上多聚腺苷酸，约250个腺嘌呤核苷酸尾巴。 3) 内含子的剪接。核mRNA前体含有边界顺序、分枝点序列及其内含子5’端保守序列，本身不能形成二级结构，必需依赖于snRNP(U1,U2,U4,U5和U6)的帮助才能形成剪接体，进行自我剪接，将内含子（intron）去除，而把外显子（exon）连接起来。 4) 化学修饰。某些碱基进行甲基化等修饰 真核生物细胞的RNA 内含子剪接的主要方式。 简述转录因子的结构特点及其作用。 转录因子也称转录激活因子，它们可对转录起始复合物的组装及转录速率施加影响，决定某一基因是否表达，通常有一个标准结构，存在DNA结合域和转录激活结构域。 DNA识别或结合域能和特定的基因的启动子区结合，但不能激活基因的转录；转录激活结构域可以在适当的空间激活转录。 概括典型原核生物启动子的结构和功能。 启动子是与RNA聚合酶结合和转录起始的特殊序列。典型的原核生物启动子大约40个核甘酸并有2个重要的序列。 －35区：位于复制起始位点上游35个核甘酸的6个核甘酸序列，能被RNA聚合酶全酶识别并结合。其中，?亚基在识别中起重要作用。因为没有?亚基的核心酶只能随机地结合在DNA上。 －10区：位于－10处的6核甘酸序列。RNA聚合酶松散结合到－35区后，沿着DNA移动到－10区并解链，形成紧密结合的复合体，确保转录方向。保守序列TATAAT。 蛋白质合成 简述真核与原核核糖体的主要区别是什么？真核细胞80S核糖体中核糖体蛋白和rRNA数量和体积均比原核细胞70S核糖体的大，其体积约为原核的2倍。真核细胞的大小亚基（即40S与60S）均比原核细胞