ABO血型鉴定与血涂片观察2014-3解析.ppt

ABO血型鉴定暨血涂片制作和血细胞观察 邹方东 教授 助教：阳敏 glorym@ 课程QQ群： 299535378 课件共享：QQ群、课程中心网站 实验报告提交时间：5月8日10时~16时 地点：第一实验大楼C102 期末考试时间：课堂通知、网站、QQ群 （一般是最后一次课之后的一两周） 注意事项 实验目的 掌握光学显微镜的使用方法； 了解人体血液以及输血相关常识； 掌握ABO组成以及分型原则； 初步掌握血涂片制片的方法和练习光学显微镜的常规使用。 第一节 显微镜的使用 光学显微镜的构造 显微镜的正确使用方法 显微镜的保养 油镜的使用与清洁（了解） 目镜 物镜 载物台 焦距粗\微调螺旋 集光镜 聚光镜 视度调节圈 瞳距调节拉板 物镜转换器 光源亮度调节手轮 载物台左右推进螺旋 显 微 镜 的 结 构 操作步骤（一） 1、将凳子调节到合适的高度，保持桌面整洁； 2、手握镜柱将显微镜轻轻挪出，目镜筒与桌边对齐，将镜罩拿下放于抽屉中，插上电源； 3、调节物镜转换器胶轮到4x物 镜（最短物镜），缓慢旋转粗准 焦螺旋，将载物台调到最低； 4、打开集光灯电源，将灯光调节到适当亮度，将集光镜调节到最高； 5、将目镜调节到合适的瞳距，调节聚光镜轮找到白亮的视野； 操作步骤（二） 6、将青蛙血涂片正确放置于载物台，将涂有血细胞的一面朝上，用玻片夹固定； 7、缓慢调节粗准焦螺旋，将载物台调到最高； 8、双眼从目镜观察视野，将两个视野合并为一个。缓缓调节粗准焦螺旋使载物台下降，找到物像，配合细准焦螺旋将物像调节清晰； 9、使用物镜转换器胶轮，将10X或40X目镜调节到位，配合粗细准焦螺旋和聚光镜、集光镜亮度将视野调节清晰； 注意玻片的正确放置！ 操作步骤（三） 10、将物镜调到4x，载物台调低，取出玻片放于适当位置，用擦镜纸轻轻擦拭用过的目镜与物镜； 11、关闭聚光灯，拔出插头，将载物台调高后将线缆轻轻缠绕在显微镜柱上； 12、将目镜调节拉板调回，套上镜罩，将显微镜轻轻放回。 第二节 ABO血型鉴定与血涂片制作 ABO血型鉴定原理与鉴定方法 血涂片制作与观察 红细胞、白细胞的识别（照相） 一次性医用采血针 酒精消毒棉球 抗A血清(蓝色)，抗B血清(黄色) 瑞氏染液 载玻片，消毒牙签 显微镜(带油镜，香柏油，擦镜纸，洗镜液) 实验材料与仪器 红细胞 抗原 （表型） 血型鉴定原理 1、抗A血清含有使A型血凝集的抗体（A凝集素）， 抗B血清含有使B型血凝集的抗体（B凝集素）； 2、A型血：抗A血清凝集、抗B血清不凝集 B型血：抗A血清不凝集、抗B血清凝集 O型血：抗A血清、抗B血清均不凝集 AB型血：抗A血清、抗B血清均凝集 凝集 血浆 水、糖类、脂类、蛋白质和钾盐、钠盐、钙盐的混合物。 红细胞 白细胞 血小板 血浆 55% 红细胞 45% 白细胞 0.1% 血小板 0.17% 血液的组成 血细胞的组成 小淋巴细胞 嗜曙红细胞 单核细胞 血小板 嗜中性粒细胞 嗜碱性细胞 巨淋巴细胞 红细胞 实 验 步 骤 注意：有严重晕血史的同学请不要参加实验，可到休息室休息，待放学后离开！ 准备 （1）取三张载玻片，用吸水纸将两面擦干，放于白纸上； （2）取一张玻片，如图在两端分别滴上抗A、抗B血清，在白纸上标明； （3）取未用过的采血针，检查包装是否破损、是否干燥，检查牙签； A B 第1张：血型鉴定 第2张：血涂片 第3张：血涂片推片 采血 （4）用酒精棉球将左手无名指消毒，以穿刺法，用一次性医用采血针无名指指腹迅速扎一下，取血； 注意：采血针、牙签、棉花等请勿混用，以免造成交叉感染，用完即弃入垃圾桶中！ 酒精棉球消毒 扎取无名指采血 （5）用右手自无名指指腹下端挤压，流出适量血液； （6）用第一根牙签蘸取少许血液混于抗A血清，搅拌混匀，将牙签放入垃圾桶；再用另一根牙签蘸取血液混于抗B血清（切记换牙签！！）； （7）将此玻片静置与空闲处，观察血液是否凝集； 血型鉴定 请问：上图是什么血型？？ 血型鉴定 （8）取末捎血一滴置于玻片的一端，左手持，载片上保留下一薄层血膜载玻片，右手以边缘平滑的推片的一端从血滴前方后移接触血滴，待血滴即沿推片散开。然后使推片与载片夹角保持30-45度平稳地向前移动； 血涂片制作 血涂片制作 ① ② ③ ④ 推 片 动 作 (9) 血涂片制成后可手持玻片在空气中挥动，使血膜迅速干燥，以免血细胞皱缩； (10) 将干燥后的血膜平放在实验台上，加瑞氏染液2-3滴,使覆盖整个血膜，固定5-10min，注意不要让染液干掉，如若有干燥请覆以少量清水； 血涂片制作 (11)用流水小心冲去染液，待自然干燥后或用吸水纸吸干