安徽大学色谱分析沈效锋课件第一章绪论解析.pptVIP

色谱分析概论 教材：色谱分析概论 傅若农编 第一章 绪论 第一节 色谱法的发展简史 一、色谱法的出现 1903年，俄国植物学家Mikhail Tswett (茨维特)最先发明。他采用填充有固体CaCO3细粒子的玻璃柱，将植物色素的混合物(叶绿素和叶黄素chlorophylls xanthophylls)加于柱顶端，然后以溶剂淋洗，被分离的组份在柱中显示了不同的色带，他称之为 色谱（chromatography） (希腊语“chroma”=color; “graphein”=write) 同年，库恩又把注意力集中在维生素的研究上，确定了维生素A 的结构。 1933年库恩从35000升脱脂牛奶中分离出1g核黄素（即维生素B2），制得结晶，并测定了它的结构。 此外，他还用色谱法从蛋黄中分离出了叶黄素；还曾把腌鱼腐败细菌中所含的红色类胡萝卜素确定离析出来并制成结晶。 1941年，Martin,和 Synge 提出色谱塔板理论；发明液-液分配色谱；预言了气体可作为流动相（即气相色谱）。 三、色谱法的现状和未来 气相色谱和高效液相色谱发展最好 气相色谱仪及备件 全球市场: 约10亿美元/年; 3-4%年增长 高效液相色谱仪及备件 超过30亿美元/年，6-8%年增长 超临界流体色谱处于失利地位 毛细管电泳与毛细管电色谱处于研究阶段,进入部分应用领域 为基因组学研究作出了杰出贡献 目前存在的主要问题： 分析结果偏差大 比HPLC大一个数量级 机遇：分离分析生物大分子 第二节、色谱法在工业生产和科学研究中的作用 1930-1940年代为分离复杂的生物组成发挥了独特作用 1950年代为石油工业的发展作出了贡献 1960-1970年代成为石油化工、化学工业等部门的分析检测手段 目前，色谱法已成为生命科学、医药科学、环境科学、材料科学、食品科学、法庭科学以及航天科学等研究领域的重要手段 在分析化学中的地位和作用 色谱分析法的特点是他具有高超的分离能力，而各种分析对象又大都是混合物，为了分析鉴定他们是由什么物质组成和含量是多少，必须进行分离，所以色谱法成为许多分析方法的先决条件和必需的步骤 第三节 色谱法与其他方法的比较和配合 一、色谱法的特点和优点 1、色谱法特点： 分离能力高超，分离效率远远高于其他分离技术，如蒸馏、萃取、离心等方法 2、色谱法优点： （1）分离效率高 复杂混合物，有机同系物、异构体。手性异构体。 （2） 应用范围广 气相色谱：沸点低于400℃的各种有机或无 机试样的分析。 液相色谱：高沸点、热不稳定、生物试样的分离分析。 超临界色谱：难挥发，易热解的天然产物，高分子化合物 （3） 分析速度快 一般在几分钟或几十分钟内可以完成一个试样的分析。 （4）样品用量少 （5） 灵敏度高 可以检测出μg.g-1(10-6)级甚至ng.g-1(10-9)级的物质量。 （6）分离和测定一次完成，可以和多种仪器联用 （7）易于自动化，可以在工业流程中使用 二、色谱法和其他方法的配合 1、色谱法的缺点 被分离组分的定性较为困难。 2、和其他方法的配合 GC-MS, GC-FTIR, GC-ICP/AES LC-MS, CE-MS, 分离-信息技术相结合 第四节 色谱法的定义与分类 一．定义 色谱法是一种物理化学分离分析技术。它借物质在两相间的分配不同，使混合物中各组分彼此分开的技术，又称色层法、层析法。 在色谱法中存在两相，一相是固定不动的，我们把它叫做固定相；另一相是携带样品流过固定相的流动体，称为流动相。当流动相中样品混合物经过固定相时，就会与固定相发生作用，由于各组分在性质和结构上的差异，与固定相相互作用的类型、强弱也有差异，因此在同一推动力的作用下，不同组分在固定相滞留时间长短不同，从而按先后不同的次序从固定相中流出。 二、色谱法分类 1、按流动相和固定相的状态分类 二、按使用领域不同对色谱仪分类 （1） 分析用色谱仪 （2）制备用色谱仪 （3）流程色谱仪 三、按分配原理分类： 置换色谱法 置换色谱实质上是一种非线性色谱技术。操作程序包 括色谱柱上的分配平衡、上样、加置换剂、洗脱、 分步收集、色谱柱再生等过程。 由于各个组分在固定相上的竞争分配，分配系数大 的组分置换分配系数小的组分，并推动分配系数小 的组分沿柱长方向移动。系统达到分配平衡后，样 品中各个组分按照其分配系数K 的大小形成系列色 谱区带（称为色谱置换序列displament train），最终 使样品各个组分分离。 在置换剂推动下样品各个组分依次流出色谱柱。置 换剂可以包含在惰性的流动相中。 ? 色谱柱进行再生，准备进行下一次置换分离 操