02分光光度计解析.pptVIP

二、定量分析的基础－Beer - Lambert定律 A=Kcl A=εcl 在一定的浓度范围内，物质对某一波长的光的吸光值与物质的浓度成正比，与光通过的路径成正比。 偏离Beer-Lambert定律的因素  浓度过高 非单色光 非吸收光 散色 其他因素 第一节 紫外可见分光光度计(UV-Vis spectrophotometer) 分光光度计的组成（Spectrophotometer component parts) 光源-单色器-比色槽-检测器-显示器 钨灯 钨卤灯 氘灯 1光源 A?? 高强度 B.宽波长范围 C.稳定的输出 D.长寿命 E.价格低 F.适宜的尺寸 Lamp Tungsten Tungsten-halogen Deuterium 波长 330-2500 200-900 190-370 寿命 长 长 短 输出能量 15%在可见区 高 高 与V4成正比 2单色器 1.???? 要求特性 A.高效能 B.宽波长范围 C.容易调节波长 D.好的波长精度和重现性 E.高的光谱纯度 F.好的机械稳定性 滤光片单色器 组成: 入口狭缝,滤光片口,狭缝三部分组成。 性能： 吸收滤片 干涉滤光片 光谱通带宽度(nm) 20-30 10-15 透过率 15-20% 40-60% 棱镜和光栅单色器 光谱通带宽度 少于 1nm 组成: 狭缝 色散元件 准直元件: 透镜反射镜 棱镜和光栅单色器比较： A、光栅为匀排光谱,棱镜为非匀排光谱。光栅所采用的狭缝可产生几乎恒定的光谱通带而与波长无关。棱镜要得到恒定的带宽时,长波时要求狭缝窄,短波时要求狭缝宽一些。 B?? 光栅对温度不敏感,棱镜对温度很敏感(折射率n与温度有关)。 C、光栅存在着潜在的杂散光源。 D、光栅需要有一个“级消除滤光片”以消除λ/2,λ/3,..等波长的干扰。 E、光栅光能量消耗大。 3 样品池 ( Sample cell) 按材料不同分: 玻璃池 340-1000nm 石英池 200-340n 紫外级石英池 185-220nm 按用途分: 常用比色池 0.5, 1.0, 1.5, 2 微 量 池 0.5毫升以下 流 动 池 5-11微升 注意：样品池使用前必需进行以下测定: 玻璃池: 365nm时, 每个池之间△T0.5%,即△A0.002 石英池: 240nm时, 每个池之间△T1.5%, 即△A0.007 4 检测器 ( Detectors ) 作用: 光信号转变为电信号。 A. 几种光检测器性能的比较 光电池 光电管 光电倍增管 波长(nm) 400-750 190-650(蓝敏) 180-900 响应速度 慢 约10-8 秒 10-9 秒 灵敏度 低 105 --106 108 -109 B、结构和作用 a.???? 真空光电管（Vacuum Phototube） 篮敏光电管阴极镀有光电发射材料金属锑和铯。 红敏光电管阴极镀有光电发射材料金属银和氧化铯。 b.光电倍增管（Photomultipliers） 作用: 除了将光信号转变为电信号作用外,还具有放大作用。 二、分光光度计的结构（Spectrophotometer configurations） 1、单光束争光光度计(Single beam instruments ) 优点:结构简单,易操作,灵敏度高。 缺点:光源不稳定影响结果的准确性和重现性。 2、双光束分光光度计（Double Beam spectrophotometer） 特点: 消除光源不稳定的影响,灵敏度没有单光束那么高 ? 第三节 定性和定量分析  Quantitative and Qualitative Analysis 一.仪器条件的选择 1.测量波长的选择 A.???? 优先选择最大吸收波长 B.最大波长受到共存杂质干扰时,选择次强波长。 C 最大波长的吸收峰太尖锐,测量波长难以重复时,选择次强波长。 2. 透过率或吸光度的范围的选择 选择T＝15%--70%或A＝0.150