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动物实验简述 高志买 2013-07-9 动物实验的基本技术方法 肿瘤的动物模型 常用实验动物 动物实验的基本技术方法 一、动物实验前的条件准备（实验动物、实验仪器、药品、试剂）和预实验 二、动物实验的设计与分组 设计原则： 1、对照性原则（同体、异体） 2、一致性原则 3、重复性原则（估测，小动物10-30；中6-20；大6-20） 4、随机性原则 5、客观性原则 分组：随机性（抽签、随机数字表） 三、实验动物的麻醉 四、实验动物的给药途径与方法 根据：实验目的、动物种类、药物类型。 五、实验动物生物样本采集（血液、尿） 采血量 采血部位 动物 取少量血 尾静脉 大鼠、小鼠 耳静脉 兔、狗、猪、猫 眼底静脉 大鼠、小鼠、兔 舌下静脉 狗 腹壁静脉 青蛙、蟾蜍 取中量血 后肢小隐静脉 猫、狗、猴 前肢皮下头静脉 猫、狗、猴 耳中央动脉 兔 颈静脉 猫、狗、兔 心脏 大鼠、小鼠、豚鼠 断头 大鼠、小鼠 取大量血 股/颈动脉 兔、狗、猴、猫 心脏 兔、狗、猴、猫 摘眼球 大鼠、小鼠 实验动物尿液采集： 1、代谢笼法（大鼠，小鼠） 2、输尿管插管（兔，狗） 3、尿道插管（兔，狗） 4、压迫膀胱（兔、猫、狗） 5、穿刺膀胱（狗、猪、兔） 6、膀胱手术插管（猪、狗） 7、反射法（小鼠） 六、实验动物观察指标的测定 七、动物安乐死方法 颈椎脱臼法 小鼠、大鼠、豚鼠、兔 空气栓塞法 兔、猫、狗 放血法 小鼠、大鼠、豚鼠、兔、狗 断头法 鼠 药物注射法（kcl、麻醉剂） 兔、猫、狗、豚鼠（较大大动物） 药物吸入法（CO2、CO、乙醚、氯仿） 鼠类等小动物 实验动物肿瘤模型 人类疾病动物模型：用人为的方法使动物在一定的致病因素（物理、化学、生物）作用下，造成动物组织、器官或全身一定损伤，出现某些类似人类疾病的模拟表现的动物实验对象和相关材料。 诱发性肿瘤动物模型 使用致癌因素在实验条件下诱发动物发生肿瘤的动物模型。 如： 大鼠灌胃二乙基硝酸胺可诱发肝癌； 小鼠肩胛皮肤上涂抹亚胺基偶氮甲苯可诱发肝肿瘤； 小鼠皮下注射二乙基硝酸胺可诱发肺癌，等等 缺点：成瘤周期长，成瘤率不太高。 移植性肿瘤动物模型 目前抗肿瘤药物的临床前研究大都使用移植性肿瘤动物实验模型。 优点：成瘤率高，生长速率较一致，个体差异较小，条件易于控制。 B16(小鼠黑色素瘤细胞) C57/BL 5X106C/天X4天 1X106C/天X4天 C57,4周龄，体重16-20g， 收集对数生长期细胞，PBS调整细胞浓度，苔盼蓝染色，细胞活力95%, X6只 X6只 concentration: 2.5x107c/ml，0.2ml concentration: 0.5x107c/ml, 0.2ml 观察小鼠肿瘤出现时间，生长情况，称小鼠体重，记录小鼠生活状态。 处死小鼠，取肿瘤组织及主要脏器，称量，统计重量。固定，制成石蜡切片，进行HE染色，病理学观察。免疫组化检测其特异性抗原HMB45、S-100。 ICR,4周龄，体重20-24g， * *