IL-33TLRs信号通路在A549细胞上皮-间质转化中的作用教程分析.docVIP

IL-33/TLRs信号通路在A549细胞上皮-间质转化中的作用 摘要 目的 观察生长转化因子β1（TGF-β1）对上皮来源的A549细胞增殖及相关细胞标记物的影响，探讨IL-33/TLR4信号通路在上皮来源的A549细胞上皮-间质转化中的作用。 方法 培养A549细胞，用5ng/ml的TGF-β1刺激A549细胞；在不同时间点，MTT法检测TGF-β1对A549细胞增殖的影响；Real-time PCR方法检测IL-33/TLR4信号通路中关键因子IL-33，TLR4、PI3K基因的表达改变；western blot方法检测α-SMA， E-cad， p-AKT蛋白的动态表达。 结果 （1）.MTT结果显示，各组细胞生长良好，随时间的延长，细胞数量逐渐增多，但加入5ng/ml TGF-β1刺激12h，24h，48h后，A549细胞的增值与对照组相比，无统计学意义（P0.05）。 （2）.在5ng/ml的TGF-β1刺激下，A549细胞与对照组相比，E-cad蛋白表达量逐渐下降（P0.05），而α-SMA的表达呈逐渐上升的趋势（P0.05）。提示，A549细胞上皮细胞特征逐渐减少，而间质细胞特征逐渐增多，即A549细胞发生了上皮-间质转化。 （3）. Real-time PCR结果显示，经5ng/ml的TGF-β1处理的A549细胞与对照组相比，在12h、24h、48h，IL-33