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- 2016-04-23 发布于湖北
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小结: 基因工程的基本操作程序 * 专题1 基因工程 1.2 基因工程的基本操作程序 四个步骤 一、获取 二、构建 三、导入 四、鉴定 一、获取——目的基因 (一)人工合成 (二)自然物种分离 1、PCR 2、基因文库 1、PCR技术 聚合酶链式反应(polymerase chain reaction) (1)原理:DNA双链复制的原理 (2)过程 高温变性(90~95℃) 低温退火(55~60℃) 中温延伸(70~75℃) 多次重复 (3)条件 酶 模板 引物(对) 原料 热稳定DNA聚合酶 如何利用PCR技术获取目的基因? 引物(对) 一段已知目的基因核苷酸序列 下图表示利用PCR技术扩增 目的基因的部分过程,其原 理与细胞内DNA复制类似。 下列叙述错误的是 A.从理论上推测,第二轮循环产物中含有引物A的DNA片段占3/4 B.在第二轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段 C.引物之间或引物自身发生碱基互补配对则不能扩增目的基因 D.耐热的DNA聚合酶总将游离的脱氧核苷酸连接到3’端 B 2、基因文库 (1)基因组文库 (2)部分基因文库 cDNA文库 基因组文库和部分基因文库 二、构建——基因表达载体 (1)将图中①的DNA用HindⅢ、BamH Ⅰ完全酶切后,反应管中有 种DNA片段。 (2)图中②表示HindⅢ与BamH Ⅰ酶切、DN
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