化验员微生物理论(检验员基础资料)课件解读.ppt

微生物检测 掌握鉴定点 一、微生物基础知识 微生物检测 二、培养基配制 微生物检测 三、无菌操作 微生物 目录 一、微生物的基础知识 二、培养基的配制 三、无菌操作 一、微生物的基础知识 1 微生物的概念 指肉眼看不见或难以看清的微小生物的总称。 大小：一般小于0.1mm 2 微生物类群（按细胞结构分类） （1）非细胞型微生物：病毒与亚病毒 （2）原核细胞型微生物：细菌、放线菌、蓝细菌、支原体、衣原体、立克次氏体、古细菌 （3）真核细胞型微生物：真菌（霉菌/酵母菌/蕈菌）、单细胞藻类、原生动物 3.微生物的共性 个体小：小于0.1mm。肉眼不可见。 分布广 ：自然界中到处都有，如水、空气、土壤等, 土壤中的数量最多。 代谢强：发酵乳糖的细菌在1小时内可分解其自重1000～10000倍的乳糖；产朊假丝酵母合成蛋白质的能力比食用公牛强10万倍 繁殖快：微生物有惊人的繁殖速度，大多数微生物20分钟内就可以繁殖一代 易变异：耐药性产生的原因 4.微生物在自然界的分布 分布:空气、土壤、水、食物、动植物、人体、用具物品等。 土壤：是微生物生活的最适环境 水：仅次于土壤的微生物分布、定居的第二场所 空气：空气中的微生物主要来源于带有微生物菌体及孢子的灰尘，这类微生物大多数是腐生性的，还来源于人和动物，它们大多数是通过呼吸道排出的，其中也包含有病原微生物，悬浮在大气中。 5.细菌 定义：细菌是一类细而短，结构简单，细胞壁坚韧，以二等分裂方式繁殖的水生性较强的原核微生物 形态:根据其外形可分为球菌、杆菌、螺旋菌（弧菌和螺菌）三大类。 细菌细胞的基本结构:细胞壁、细胞膜、细胞质、核区。（鸡蛋结构） 细菌细胞的特殊结构（只有某些细菌才具有）: 糖被、芽胞、 鞭毛、菌毛等。 葡萄球菌 6.霉菌（霉菌是丝状真菌的俗称） 形态特征：霉菌的营养体由分支和不分支的菌丝构成，许多菌丝相互交织形成菌丝体。菌丝是中空管状结构。 7、酵母菌 形态特征：形态通常有圆形、椭圆形、圆柱形等。比细菌的单细胞个体要大得多，一般宽约1～5微米，长5～20微米。 9、菌落总数（aerobic plate count） 定义： GB 4789.2-2010：食品检样经过处理，在一定条件下（如培养基、培养温度和培养时间等）培养后，所得每g（ml）检样中形成的微生物菌落总数 P246：指一定数量或面积的食品样品，在一定条件下进行细菌培养，使每一个活菌只能形成一个肉眼可见的菌落，然后进行菌落计数所得的菌落数量。通常以1g或1ml或1cm2样品中所含的菌落数量来表示。 测定菌落总数时的培养条件：37°C培养48h GB 4789.2-2010：36°C±1°C培养48h±2h， 水产品30°C±1°C培养72h±3h 测定菌落总数的均质条件 （GB 4789.2-2010） 固体半固体样品：放入盛有磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内，8000r/min～10000r/min均质1min～2min，或放入盛有稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min～2min。 液体样品：吸取至盛有磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀 10.菌落计数（GB 4789.2-2010） 11、菌落计数的计数方法（GB 4789.2-2010） 12、菌落总数的报告要求 13、大肠菌群 概念 指一群在37°C能发酵乳糖、产酸、产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性的无芽孢杆菌 最可能数（MPN） 基于泊松分布的一种间接计数方法（应用统计学的原理所测定和计算出的一种最近似数值） 测定大肠菌群时初发酵试验的培养条件 36°C±1°C培养24h±1h，观察是否产气，产气的进行复发酵实验，未产气的继续培养至48h±2h 测定大肠菌群时复发酵试验的培养条件 36°C±1°C培养48h±2h 测定大肠菌群时样品均质条件 固体半固体样品：放入盛有磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内，8000r/min～10000r/min均质1min～2min，或放入盛有磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min～2min。 液体样品：吸取至盛有磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀 测定大肠菌群时样品匀液的酸度要求 pH值应在6.5～7.5之间 大肠菌群平板计数 LST培养基的制备 BGLB培养基的制备 二、培养基的配制 1、培养基的分类 根据原料来源不同，可将培养基分为合成培养基、半合成培养基与天然培养基。 根据培养基的物