病毒感染诊断、特异性预防.ppt.pptVIP

病毒感染的检查方法与防治原则 一、 病毒感染的检查方法 1、 标本采集与送检： 用于分离培养的标本： 采集急性期标本、防止病毒灭活、 不同病毒感染-不同部位、可加抗菌素 血清学诊断的标本： 双份血清（早期、恢复期）、注意冷藏（-20 oC） 2、常规分离与鉴定 动物接种 鸡胚接种 组织培养 三大培养方法 器官培养 移植培养 细胞培养 原代细胞 二倍体细胞 传代细胞 动物接种——动物发病 鸡胚接种——鸡胚死亡或出现病变 细胞培养——细胞病变 CPE (cytopathic effect)（团缩、裂解、肿大等） 包涵体 红细胞吸附 病毒感染的指标 红细胞吸附 CPE 正常细胞 病变细胞 包涵体 病毒数量和感染性测定 1、蚀斑试验 2、ID50 或 TCID50 感染鸡胚动物或细胞后，引起 50% 发生死亡或病变的最小量 病毒感染单层细胞后，产生的局限性病灶，称蚀斑，蚀斑是由一个感染性病毒体复制形成的，称蚀斑形成单位，病毒悬液中的感染性病毒量以每毫升的蚀斑形成单位来表示 3. 病毒的血清学诊断 中和试验 补体结合试验 血凝抑制试验 免疫扩散等 是病毒在活体或细胞培养中被特异性中和抗体作用而失去感染性的一种实验 中和试验(Neutralizaton assays) (病毒+病人血清) 细胞 有无病变 特异性抗体与相应病毒结合，使病毒失去凝集红细胞的能力，从而抑制血凝现象的一种实验 血凝抑制试验 (emagglutination inhibition assays) (含血凝素病毒 +病人血清) 红细胞 血凝有无抑制 4. 病毒的快速诊断 光镜-----包涵体、融合细胞 电镜 免疫荧光 ELISA 分子生物学技术 杂交 Southern blot PCR Northern blot 二、 病毒感染的防治 免疫预防—人工主动免疫 灭活疫苗 乙脑疫苗 狂犬疫苗 流感灭活疫苗 HAV，HBV疫苗等 减毒活疫苗： 风疹疫苗 麻疹疫苗 腮腺炎疫苗 脊髓灰质炎疫苗 HAV疫苗 其它新疫苗： 基因工程疫苗： 核酸疫苗： 合成多肽疫苗： 二、 病毒感染的防治 免疫预防—人工被动免疫 紧急预防：甲型肝炎、麻疹、脊髓灰质炎等 风疹疫苗 给机体注射病毒中和抗体或细胞因子、干扰素等，使机体立即获得特异的免疫力 治疗 药物治疗 基因治疗 反义核苷酸 核酶 免疫治疗 特异性抗体 治疗性疫苗 非特异性免疫调节剂 药物防治 金刚烷胺-------抑制病毒脱壳-----预防感冒 RNA或DNA类似物 阿糖腺苷类、 无环鸟苷、 二羟丙氨甲基鸟嘌呤迭氮酰氨胸苷 抑制人类HIV逆转录作用 治疗AIDS ------治疗疱疹性脑炎等疱疹病毒感染