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1 在基因工程实践中,常用的载体有(质粒,噬菌体和病毒DNA分子。质粒DNA不仅能在细菌中复制,并且在添加真核复制信号和启动子后,可以构建出能在原核和真核细胞中均可复制的穿梭质粒,并在真核细胞中表达
载体的特点: 1、 至少有一个复制起点,因而至少可在一种生物体中自主复制。 2、?至少应有一个克隆位点,以供外源DNA插入。 3、?至少应有一个遗传标记基因,以指示载体或重组DNA分子是否进入宿主细胞。4、具有较小的分子量和较高的拷贝数。
2(限制性酶和DNA连接酶控制型质粒松弛控制型凯利·穆利斯真核细胞人工种皮人工胚乳胚状体贴壁培养、悬浮培养和固定化培养习惯命名和系统命名蛋白质工程通过重组作用所产生的具有与双亲中任一方都不同的基因型的子代。不同来源的DNA组合成的分子细胞融合是在自发或人工诱导下,两个的细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞由胚胎内细胞团或原始生殖细胞经体外抑制培养而筛选出的细胞,具有发育全能性
多能干细胞:胚胎干细胞逐渐分化,失去全能性而变得比单一,只能分化成一个系统中的几种细胞,而不能生成其他系统的细胞。即为多能干细胞。多能干细胞继续分化变为专能干细胞。多能和专能干细胞统称为组织干细胞。
5 抗体酶 通过改变抗体中与抗原结合的微环境,并在适当的部位引入相应的催化基团,所产生的具有催化活性的抗体。
6 模拟酶 用合成高分子来模拟酶的结构、特性、作用原理以及酶在生物体内的化学反应过程
机理酶模拟:通过对酶作用机制如识别、结合和过渡态稳定化的认识,来指导模型酶的设计和合成
7 蛋白质组学阐明生物体各种生物基因组在细胞中表达的全部蛋白质的表达模式及功能模式的学科。包括鉴定蛋白质的表达、存在方式(修饰形式)、结构、功能和相互作用等。把由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官叫做外植体一种生物体具有的所有遗传信息的总和。基因组应该指单倍体细胞中包括编码序列和非编码序列在内的全部DNA分子。发酵工程,是指采用现代工程技术手段,利用微生物的某些特定功能,为人类生产有用的产品,或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。水溶性酶经物理或化学方法处理后,成为不溶于水的但仍具有酶活性的一种酶的衍生物。在催化反应中以固相状态作用于底物。固定化酶不溶于水的酶。是用物理的或化学的方法使酶与水不溶性大分子载体结合或把酶包埋在水不溶性凝胶或半透膜的微囊体中制成的。厌氧发酵是废物在厌氧条件下通过微生物的代谢活动而被稳定化,同时伴有甲烷和CO2产生。是指以一定的速度向发酵罐内添加新鲜培养基,同时以相同速度流出培养液,从而使发酵罐内的液量维持恒定的发酵过程。
15传统生物技术主要是通过微生物初级发酵来生产产品,一般包括如下三个步骤:
1.上游处理过程:菌种的选育及对供微生物利用的原料进行加工。(优良种株的选育和保
藏(包括菌种筛选、改造菌种代谢路径改造等),
2.发酵与转化。发酵过程控制,主要包括发酵条件的调控,无菌环境的控制,过程分析和控制等
3.下游处理过程:对发酵物中所需的目的产物进行纯化的过程。分离和纯化产品。包括固液分离技术、细胞破壁技术、产物纯化技术,以及产品检验和包装技术等
用携带外源基因的农杆菌Ti质粒转化植物原生质体,使外源DNA与植物染色体DNA整合,通过原生质体的培养分化成愈伤组织,最后发育成具有新性状的完整植株—转基因植物
酶工程(enzyme engineering)
概念:利用酶、细胞器或细胞所具有的特异生物催化功能, 对酶进行修饰改造,并借助工程手段来生产人类所需产品的一门技术。它包括酶制剂的制备、酶的固定化、酶的修饰与改造等方面内容。酶工程的应用,主要集中于食品工业,轻工业以及医药工业中。如:加酶洗衣粉
蛋白质工程的主要步骤通常包括:
(1)从生物体中分离纯化目的蛋白;2)测定其氨基酸序列;3)借助核磁共振和X射线晶体衍射等手段,尽可能地了解蛋白质的二维重组和三维晶体结构;(4)设计各种处理条件,了解蛋白质的结构变化,包括折叠与去折叠等对其活性与功能的影响;5)设计编码该蛋白的基因改造方案,如点突变;(6)分离、纯化新蛋白,功能检测后投入实际使用。
一般发酵工程包括以下基本步骤:(1)菌种选育;(2)细胞大规模培养即发酵过程;(3)生产活性产物的诱导;(4)菌体及产物的收获
细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法,通过细胞水平或细胞器水平上的操作,按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术
植物细胞的全能性’细胞的全能性是指生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能.原因:是生物体的每一个细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质及发育为完整个体所必需的全部基因。
繁殖率高,可大批量生产取材少/培养周期短/保持优良性状
植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下,将
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