分子遗传复习题-21道技术方案.docVIP

非标准答案，仅供大家参考： 1.试谈真核生物与原核生物在基因组、基因结构方面的特点及相互间的主要不同点？ 真核生物 原核生物 基因组 复杂，3×109bp，3－4万个基因，有重复和插入序列，无重叠基因 简单，5×106bp，4000多个基因，无重复序列和插入序列，有重叠基因 转录 核内转录，转录与翻译分开，转录后加工，三种RNA聚合酶，I（rRNA），II(mRNA)，III(tRNA，5s，5.8sRNA)，mRNA寿命长，单顺反子 转录与翻译偶联，无转录后加工，一种RNA聚合酶，寿命短，多顺反子 翻译 无SD序列，扫描学说，翻译后加工修饰 SD序列，无翻译后加工修饰 2.真核基因在大肠杆菌表达的基本条件是什么？可能产生的主要问题是什么？请提出解决问题的原则和方法。 【条件】 [1]原核表达载体 提供转录、翻译所必须的调控元件，如启动子、转录终止子、核糖体结合位点等。 (1)、具有能自主复制的复制子，松弛型，质粒高拷贝数，便于质粒大量制备及表达。 (2)、强启动子、强转录终止子，便于高水平转录，防止转录通读。 (3)、可诱导性，尤其在高表达对细胞有毒性的蛋白。 (4)、合适的核糖体结合位点，提高翻译起始效率和翻译水平。 (5)、具有多个单一酶切位点的多克隆位点，且酶切位点最好位于被检测的表型基因上，便于外源基因插入及筛选。 (6)、分子量小，便于较大外源基因的插入。 (7