2013-分子遗传学-第六章-1资料分析.pptVIP

cAMP-CAP: 结合于启动子上游的激活区域，帮助RNA聚合酶形成开放型起始复合物，促进转录起始。 CAP: 转录的活化因子，直接作用于操纵子，激活基因转录。 CAP需要cAMP存在时才有活性。 （1）cAMP-CAP通过与RNA聚合酶α亚基相互作用，促进RNA聚合酶同启动子的结合。 （2） cAMP-CAP结合DNA后，使其弯曲。使RNA聚合酶结合更紧密，也促进了cAMP-CAP同RNA聚合酶的结合，有利于形成开放型起始复合物，促进转录起始。 翻译的调控主要发生在起始阶段 Ile密码子使用频率比较 反义RNA结合位点通常是mRNA的SD序列、起始密码子和N端的部分密码子 存在游离rRNA时，r-蛋白与rRNA结合装配核糖体。没有游离的r-蛋白与mRNA结合，mRNA的翻译继续。 rRNA控制r-蛋白水平 rRNA合成减慢或停止，游离r-蛋白富集，就能与mRNA 结合，阻止继续翻译。 2. 核糖体蛋白质（r-proteins）的自我调控 3.mRNA的二级结构对翻译的控制 RNA 噬菌体mRNA上有2个翻译起始位点。但只有一个可利用的起始位点，另一个被包在茎环结构中，因而核糖体不能识别它。 当第一个顺反子被翻译时，RNA的构象发生改变，使其它起始位点也能被利用。 （二）稀有密码子对翻译的影响 dnaG rpoD rpsU 核糖体 小亚基S21 引物酶 RNA pol α亚基 40000个/cell 2800个/cell 50个/cell 32 32 36 DnaG蛋白 0 74 26 α亚基 1 62 37 结构蛋白 AUA% AUC% AUU/% 蛋白质 细胞中对应于稀有密码子的tRNA较少，高频率使用稀有密码子, 翻译容易受阻，延长了核糖体在mRNA上的移动时间，降低翻译速度，影响合成总量。 （三）反义RNA对翻译的调控 反义RNA（Antisense RNA)：指与靶RNA(或DNA)具有互补序列的调控RNA。 反义RNA可与RNA 结合，阻塞核糖体与之结合的位点，从而阻止蛋白质的合成 反义RNA也可与mRMA 结合，形成双螺旋结构，成为内切酶的底物，使mRNA变得不稳定。 反义RNA也可与转录物结合，形成类似于终止子的结构，使转录提前结束。 管家基因在一个生物个体的几乎所有细胞中持续表达，这类基因表达只受启动程序或启动子与RNA聚合酶相互作用的影响，而不受其它机制的调节。管家基因的表达水平不同，但无论水平高低，它们都较少受环境变化的影响，而且在个体各个不同的生长阶段几乎全部组织中持续表达，或变化很少。其它基因均不具备这些特性。 细胞的编码基因分为两类：管家基因和奢侈基因。管家基因是维持细胞生存必需的一类基因，在各类细胞中都处于活动状态。奢侈基因是在不同组织细胞中选择表达的基因，与分化细胞的特殊性状直接相关，这类基因的丧失对细胞生存没有直接影响。目前一般认为，细胞分化主要是奢侈基因中某些特定基因有选择地表达的结果。 lacZ 编码β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)，它的活性形式是分子量约500kD 的四聚体，能催化β-半乳糖苷水解，例如，它能将乳糖水解为葡萄糖和半乳糖 lacY 编码β-半乳糖苷透性酶(Permease)，它是分子量为30kD 的膜结合蛋白，是转运系统的组成成分，将β-半乳糖苷转入细胞。 LacA编码β-半乳糖苷转乙酰基酶(Transacetylase)，它将乙酰基团从乙酰辅酶A 转移到β-半乳糖苷上。 左端的LacI基因有它自己的启动子和终止子，LacI基因的末端紧接启动子P。操作基因O 占据LacZ 基因的前26bp，LacZ基因之后是LacY基因和LacA基因以及终止子。 我们根据对突变的影响来区分结构基因和调控基因。结构基因突变只引起其编码的特定蛋白质失活。而调控基因的突变则影响其控制的所有结构基因的表达。调控基因的突变揭示了调控的类型。lacZYA 基因的转录受lacI 基因指导合成的调控蛋白控制。 LacI 基因正好与结构基因相邻，但它不与结构基因属同一转录单位(Transcription unit)，它有自己独立的转录单位，含自己的启动子和终止子。LacI编码可扩散的产物，理论上它不必位于结构基因的附近，它移到其它任何地方或作为一个DNA分子片段都能很好地发挥作用(归类为反式作用调控因子) 乳糖操纵子的控制属负调控：即它被调控蛋白关闭转录。调控因子的失活突变导致功能基因保持表达状态。lacI 的表达产物称为乳糖操纵子阻遏蛋白(Repressor)，因为它的功能是阻止结构基因的表达 阻遏蛋白通过与lacZYA 基因簇开始处的操纵基因结合发挥功能。操