diego血型综述.docVIP

传统的Dia和Dib相应的ISBT符号为DI1和DI2,这是Diego血型系统中最具有临床意义的一对抗原.Diego血型系统抗原相应的抗-Dia可以引起新生儿溶血病,也可以破坏输入的Dia抗原红细胞,抗-Dib非常罕见,但同样能引起新生儿溶血病(HDN)和溶血性输血反应,具有临床意义,Dia和Dib抗原可以用血清学方法鉴定,但试剂较为昂贵,特别是抗-Dib定型试剂,市场上更是难以购买,且临床因产生抗-Dib所引起的输血问题,寻找相合的血源是非常困难的,我国随机人群中调查DI1基因频率为0.0357,DI2基因频率为0.9643,Di(a+b-)表现型的人低于千分之一[1],因此,笔者建立了Diego血型基因分型技术,并用于临床Diego血型的鉴定,以及Di(a+b-)献血员的筛检.… 关键词 diego血型系统 PCR-SSP Diego在1955年被发现，它因第一个产生抗新血型系统抗原的病人而命名，这个病人生下了一个患有新生儿溶血病的婴儿，在其血清中发现了一种抗体（现称为anti-Dia），这种抗体可以在怀孕期间通过胎盘屏障攻击胎儿（表达Dia抗原）的红细胞在1967，第二个diego抗原（Dib）被发现，直到1995其他的diego抗原相继被发现。现今已经发现了21种diego抗原，但以Dia和Dib最为重要，它是决定一个人diego血型的关键因素。Anti-Dia和anti-Dib既可以引起新生儿溶血病又可以引发输血不良反应【1】，特别是新生儿溶血病在东南亚和南美普遍是由diego抗体所引起的，因此，通过对diego血型的深入研究可以预防新生儿溶血病和因diego血型不合而引起的输血不良反应的发生。对实现安全输血有重要的意义。 Diego的抗原 Diego血型抗原现在已知有21种，其中以Dia、Dib和Wra最为重要，Dia主要存在于蒙古人中，36%南美印第安人、12%日本人和12%中国人中也能发现，然而在高加索人和黑人中较为罕见，一般在0.01%之间。Dib则在大部分人种中都能发现。 Diego血型的表型:diego血型存在4种表型，分别是Di(a-b+)、Di(a-b-)、Di(a+b+)、Di(a+b-)。Di(a-b+)在大于99.9%的高加索人和黑人和大于90%的亚洲人中都能发现。Di(a+b+)能在小于0.1%的高加索人和黑人中以及10%亚洲人中发现。Di(a+b-)只能在小于0.01%的高加索人、黑人和亚洲人中发现。而Di(a-b-)现今只有一例被发现。 Diego抗原是由SLC4A1基因所编码的，位于第17号染色体，具体在17q21-22。我国随机人群中调查DI1基因频率为0.0357,DI2基因频率为0.9643。但不同地区的基因频率有一定的差异，部分地区的分布如表1，diego血型抗原是按照一个独立的遗传系统进行 Dia和Dib抗原的分子基础是Diego基因第19外显子2561位上碱基T-C的置换。使得854位的氨基酸由亮氨酸变为脯氨酸。【2】根据DI1和DI2基因的这个特点，设计序列特异性引物，特异性扩增Diego血型的基因片段。根据扩增片段的长短来确定基因型。 Diego抗体 Diego抗体因机体受到diego抗原的刺激而相应产生，它主要包括二种类型——IgG和IgM，其中Anti-Dia和Anti-Dib属于IgG，Anti-Wra可以为IgG或IgM. Diego血型的遗传性 Diego基因扩增引物序列 引物特异性 引物序列 引物位置 产物片段 DI1 GGTCACGTCGCTCAGCGG CAGGGCCAGGGAGGCCA 137075~137092 137350~137334 276 DI2 CCAGGCAGCCACTCACAC GGTGGTGAAGTCCACGCC 137444~137427 137317~137334 129 HGHF GCCTTCCCAACCATTCCCTT 893~913 427 HGHR TCACGGATTTCTGTTGTGTTC 1319~1298 血清学方法：使用常规血型血清学方法进行血型鉴定，采用血型血清学抗球蛋白法进行血型鉴定。在96孔微量板中，每孔加5ul血清，红细胞悬液2.5ul，于37度水浴30min后，离心洗涤3次，扣干后加抗球蛋白5ul，离心，判读结果。Anti-DiaAnti-Dib 基因分型方法：从血样中抽提基因组DNA，并用2对引物对diego外显子进行特异性扩增，引物设计见文献【1】，引物序列见表1，PCR反应的内对照为人类生长激素基因（HGH）。Diego扩增的反应条件是使用10ul反应体系，DNA100ug引物，10pmol，dNTP200uM,0.25VTaq(Takara),PCR扩增程序：96度?5min,95