秋茄论文：秋茄 KcBURP基因 KcC2H2型锌指蛋白基因 转基因 抗盐性.docVIP

秋茄论文：秋茄KcBURP基因及KcC2H2型锌指蛋白基因的克隆及功能分析 【中文摘要】秋茄(Kandelia candel(L.)Druce)是红树的一种,属于非泌盐型红树,长期生活在海边,具有很强的耐盐性。前期研究显示,秋茄苗木KcBURP基因与KcC2H2型锌指蛋白基因在盐胁迫下表达明显上调,提示这两个基因可能对秋茄耐盐性有所贡献。本文以秋茄为材料,利用前期Microarry分析所获得的KcBURP及KcC2H2型锌指蛋白基因的cDNA序列设计引物,通过RT-PCR,获得这两个基因cDNA的开放读码框(ORF)。序列分析结果显示KcBURP基因的ORF长1131bp,编码一个等电点为9.07、分子量为39.8kD、由375个氨基酸组成的多肽蛋白。KcC2H2型锌指蛋白基因ORF长738bp,由245氨基酸组成,蛋白分子量约26.1kD,理论等电点为8.65。将秋茄KcBURP基因构建到植物表达载pCAMBIA-2300中,转化烟草。选取10个卡那霉素抗性株系进行基因组PCR鉴定,数据表明其中的8个株系为转基因株系。PT-PCR的结果显示在2个转基因株系中KcBURP得到过表达。150 mM NaCl处理后,野生型明显萎蔫,过表达转基因植株长势良好。进一步对野生型和转基因烟草... 【英文摘要】Kandelia candel is one of salt-tolerant mangrove species and habitats in seaside area. Preliminary studies have shown that KcBURP and KcC2H2 zinc finger gene of Kandelia candel seedlings were significantly up-regulated under salt stress, suggesting that they contributed to salt tolerance of Kandelia candel.In the presented study, the cDNA coding for the open reading frames (ORF) of KcBURP and KcC2H2 zinc finger genes of Kandelia candel were obtained by a PCR approach using the primers designed from the ... 【关键词】秋茄 KcBURP基因 KcC2H2型锌指蛋白基因 转基因 抗盐性 【英文关键词】Kandelia candel KcBURP gene KcC2H2 zinc finger gene Tobacco Salt tolerance 【索购全文】联系Q1：138113721 Q2：139938848 【目录】秋茄KcBURP基因及KcC2H2型锌指蛋白基因的克隆及功能分析 摘要 3-4 ABSTRACT 4 目录 5-8 引言 8-9 1 文献综述 9-16 1.1 红树的抗盐分子机制研究进展 9-10 1.1.1 红树抗盐基因研究进展 9-10 1.2 BURP蛋白家族研究进展 10-12 1.2.1 BURP蛋白家族及其结构特征 10-11 1.2.1.1 BURP蛋白种类 10 1.2.1.2 BURP蛋白结构特征 10-11 1.2.2 BURP家族蛋白功能 11-12 1.2.2.1 BURP与植物生长发育 11 1.2.2.2 BURP与植物生长及抗逆 11-12 1.3 植物C2H2型锌指蛋白研究进展 12-15 1.3.1 植物C2H2型锌指蛋白的结构及对靶DNA的识别 12-13 1.3.1.1 植物C2H2型锌指蛋白的结构 12-13 1.3.1.2 植物C2H2型锌指蛋白对靶DNA的识别 13 1.3.2 植物C2H2型锌指蛋白功能 13-15 1.3.2.1 C2H2型锌指蛋白与植物生长发育 13-14 1.3.2.2 C2H2型锌指蛋白与植物抗逆 14-15 1.4 本研究目的及意义 15 1.5 本研究的主要内容 15-16 2 秋茄KcBURP蛋白基因的克隆及功能分析 16-35 2.1 实验材料 16-17 2.1.1 植物材料 16 2.1.2 质粒 16 2.1.3 菌株 16 2.1.4 所用引物 16 2.1.5 主要仪器及软件 16 2.1.6 主要工具酶及生物试剂 16 2.1.7 主要溶液与培养基的配置 16-17 2.2 实验方法 17-24 2.2.1 KcBURP蛋白基因的克隆 17-18 2.2.1.1 引物设计与合成 17 2.2.1.2 改进的热硼砂法提取秋茄叶