实验报告2010细菌总数.docVIP

大学活动场所室内环境细菌密度测定 实验成员：罗小青、施俊译、上官玉虎、叶紫宇、徐丹丹 1、 目的：了解在校学生主要活动场所室内环境细菌密度情况，提高学生对自己环境卫生意识，同时锻炼学生的实际操作能力。 2、 方法：该测定有两种方法，其一是撞击法，它是通过抽气动力作用，使空气通过狭缝或小孔而产生高速气流，从而使悬浮在空气中的带菌粒子撞击到培养琼脂平板上，经37℃、48h9cm的营养琼脂平板在采样点暴露5min，或更多暴露时间进行分析，再经37℃、48h培养后，计算生长的细菌菌落数的采集测定方法。由于设备的不完全，该细菌测定方法采用采样法。 3、仪器和设备 3.1 高压蒸汽灭菌器 3.2 恒温培养箱 3.3 30个培养皿（直径90mm） 3.4 锥形瓶 3.5 PH试纸 3.6 酒精灯 4 培养基 4.1 营养琼脂培养基 4.1.1 成分：蛋白胨 10g 牛肉膏 3g 氯化钠 5g 琼脂 15~20g 蒸馏水 1000mL 制法：将上述各成分混合，加以溶解，校正PH至7.4，过滤分装，在121℃20min高压灭菌，用自然沉降法测定时，倾注15mL于培养皿中，制成营养琼脂平板。 操作步骤 设置采样点时，应根据现场的大小，选择有代表性的位置作为空气细菌检测的采样点，通常设置5个采样点，高度为1.2~1.5m。采样点应远离墙壁1m以上，并避开空调、门窗等空气流通处，本实验选择了食堂、宿舍作为实验场所，其中采样宿舍位于食堂旁边的六楼，也是我们队员男生生活的地方（四人间），通过我们生活场所来反映我们学校学生宿舍的环境情况，其采样布置点为阳台、床铺旁、书桌、门口和卫生间。采样食堂位于人比较密集的地方，以更准确的反映食堂卫生环境，其采样布置为收餐台、台子、门口、洗碗池和窗户。 将营养琼脂平板置于采样点处，打开皿盖，暴露5min盖上皿盖，翻转平板，置36℃±1℃恒温箱中，培养48h 计数每块平板上生长的菌落数，求出全部采样点的平均菌落数，以每平皿菌落数（CFU/皿）报告结果。 实验主要步骤如下图所示： 结果分析 菌落生长情况如图： 结果计算与分析： 6.2.1宿舍对应的数据如下： 宿舍 　 　 　 　 S阳台(CFU/皿) S床铺旁(CFU/皿) S书桌(CFU/皿) S门口(CFU/皿) S卫生间(CFU/皿) 34 28 70 31 20 60 85 31 127 83 47 50 55 8 41 平均 47.00 54.33 52.00 55.33 48.00 宿舍平均菌落(CFU/皿) 51.33 6.2.2食堂对应的数据如下： 食堂 　 　 　 　 T收餐台(CFU/皿) T台子(CFU/皿) T门口(CFU/皿) T洗碗池(CFU/皿) T窗口(CFU/皿) 39 51 152 15 0 55 5 36 37 72 30 126 无法计数 25 无法计数 平均 41.33 60.67 　无法计数 25.67 　无法计数 食堂平均菌落(CFU/皿) 无法计数 6.2.3数据分析： 我校某宿舍平均菌落数为51.33(CFU/皿)，依据《室内空气质量标准》GB/T18883-2002卫生标准： 生物性 菌落总数 cfu/m3 2500 依据仪器定b 按奥梅梁斯基氏计算法100cm2培养基的菌落数=每块平板数÷πr2×100 撞击法，cfu/m3 ≤2500 沉降法，cfu/皿 ≤30 远超过标准，食堂其实是我们在学校一日三餐、人流通密度大的重要公共场所，对我们身心健康影响重大，为提高食堂空气质量，应对其场所常开窗（方便而重要的方法），保持空气对流，吃饭时应养成洗手的好习惯等等。 参考文献： 1、环境工程微生物学（周群英、王士芬 编著） 2、公共场所空气中细菌总数的测定 3、《室内空气质量标准》GB/T18883-2002 4、《饭馆、餐厅卫生标准》GB16153-1996 5、刘国强,周娅. 校园空气污染微生物的检测与评价[ J ].微生物学杂志, 2004 (3) : 56 - 58. 华东交通大学开放性试验 5