第十三章微生物学新技术在环境工程中的应用精要.ppt

逆胶束酶反应系统 表面活性剂的两性分子在有机溶剂中自发形成聚集体，其亲水端连接成逆胶束的极性核，水分子插入核中，疏水性的一端进入主体有机溶剂中，酶分子溶于逆胶束中，组成逆胶束酶系统。 微生物学新技术： 遗传诱变育种 基因工程 酶工程 微生物制剂 生物表面活性剂 第十三章 微生物学新技术在环境工程中的应用 酶（enzyme）： 高效、专一性强的生物催化剂。 缺点：稳定性差（容易失活而降低催化能力）、不能重复使用、纯化困难。 13.1 固定化酶和固定化微生物在环境工程中的应用 一、酶制剂剂型 干燥粗酶制剂 稀液体酶制剂 浓液体酶制剂 干燥粉状酶制剂 固定化酶 13.1 固定化酶和固定化微生物在环境工程中的应用 酶是生物界普遍存在的物质，可以动物、植物和微生物作原料来提取酶制品。但作为酶制剂工业生产以微生物最为合适。 二、酶的提取 预处理 胞外酶：存在培养液中，过滤或离心去除菌体，清液即为粗酶液。 胞内酶：破碎细胞壁和质膜，制成无细胞提取液再提纯。 干燥、机械、超声、冷冻、溶菌酶等 13.1 固定化酶和固定化微生物在环境工程中的应用 二、酶的提取 提取：在一定条件下，用适当的溶剂处理含酶原料、使酶充分溶解到溶剂中的过程。 要充分了解酶的结构、等电点、pH、温度的稳定性、氧化还原剂对酶的影响等 常用提取方法 水溶液提取 表面活性剂提取 丁醇提取 13.1 固定化酶和固定化微生物在环境工程中的应用 三、酶的纯化 使酶与各种杂质分离，达到所需的纯度。 浓缩 去杂质 纯化 结晶 13.1 固定化酶和固定化微生物在环境工程中的应用 四、固定化酶和固定化微生物的固定化方法 固定化酶(immobilized enzyme) 又称水不溶态酶，从筛选、培育获得的优良菌体中提取活性极强的酶，再用包埋法（或交联法、载体结合法、逆束胶酶反应系统）等方法将酶固定在载体上，制成不溶于水的，使酶变成不溶于水的固态酶。 13.1 固定化酶和固定化微生物在环境工程中的应用 水溶性酶 水不溶性酶 固定化酶 固定化技术 水不溶性载体 四、固定化酶和固定化微生物的固定化方法 固定化微生物 以与固定化酶相同的固定方法将酶活力强的微生物体固定在载体上。 比固定化酶操作简单成本低 固定化细胞比天然细胞稳定性高 催化效率比离体酶高 能完成多步酶反应 固定化微生物能保留某些酶促反应所必需的辅助因子（如ATP、Mg2+、NAD等） 13.1 固定化酶和固定化微生物在环境工程中的应用 四、固定化酶和固定化微生物的固定化方法 载体结合法 物理吸附、共价结合、离子结合、生物特异结合将酶固定在非水溶性载体上。 常用载体：葡聚糖、活性炭、胶原、琼脂糖、玻璃珠、高岭土、硅胶等。 交联法 将酶与两个或两个以上官能团的试剂（双功能或多功能试剂）反应形成共价键的固定方法。 交联剂：戊二醛、双重氮联苯胺等 交联法有2种形式： 酶直接交联法 如：戊二醛和酶蛋白中的游离氨基发生Schiff反应， 酶辅助因子交联 形成席夫碱，从而使酶分子之间相互交联形成固定化酶。 13.1 固定化酶和固定化微生物在环境工程中的应用 四、固定化酶和固定化微生物的固定化方法 固定化方法 包埋法(将酶或含酶菌体包埋在各种多孔载体中，使酶固定化的方法) 格子型：酶包埋在聚合物的凝胶网格子中，使酶固定。 微胶囊型：半透性的高聚物薄膜包裹固定酶的技术。 13.1 固定化酶和固定化微生物在环境工程中的应用 将酶或含酶菌体包埋在凝胶细微网格中， 制成一定形状的固定化酶 将酶包埋在各种高分子聚合物制成的小球内，制成固定化酶 b a c 、离子结合法 （物理吸附、生物特异吸附） 胞外多聚物（Extracellular polymers，ECP） 微生物在一定的环境条件下，在其代谢过程中分泌的、包围在微生物细胞壁外的多聚化合物。 荚膜、粘液层及其它表面物质。 成分：脂、脂肽、多糖脂、中性类脂衍生物等。 用途：表面活性剂、絮凝剂或助凝剂、沉淀剂。 石油废水、油脂废水处理中可考虑应用。 13.2 微生物细胞外多聚物的开发与应用 1、生物表面活性剂和生物乳化剂的开发与应用 生物表面活性剂(Biosurfactant)是指利用酶或微生物等通过生物催化和、生物合成等生物技术从微生物、植物和动物上得到的具有表面活性的天然表面活性剂。 亲水基和疏水基结构于一体的两亲化合物。