针刺对SAMP8大脑神经元丢失干预作用的实验研究解析.docVIP

中文摘要 目的：以快速老化模型小白鼠SAMP8为阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD，老年性痴呆）动物模型，通过观察针刺对该小鼠海马和颞叶皮质神经元数量以及神经元形态、星形胶质细胞的活化增生、凋亡相关蛋白的表达的影响，研究“益气调血，扶本培元”针法对AD选择性神经元丢失的干预作用及其机制，为针刺治疗AD提供神经病理学实验依据。 方法： 48只快速老化的SAMP8雄性小鼠随机分为针刺组、非穴组、SAMP8对照组（简称P8组），每组16只；16只７月龄正常老化的SAMR1雄性小鼠作为同源正常对照组（简称R1组）。针刺组采用“益气调血、扶本培元”针法进行治疗，非穴组针刺肋下两个非穴点，P8组和R1组进行捉抓，每日1次，连续14天。处理结束后，每组10只小鼠颈椎脱臼法处死，取新鲜全脑，称重、测量脑的长度及宽度；每组另外6只小鼠麻醉后行多聚甲醛经心灌注，取脑，制作脑切片，利用甲苯胺蓝染色和免疫组化技术观察小鼠海马CA1区、CA3区及颞叶皮质的神经元形态、数量以及尼氏体、GFAP、Bax、Bcl-2的表达情况并用图像分析系统进行半定量分析，用SPSS11.0软件包进行统计学处理。 结果： SAMR1小鼠全脑长度、宽度及重量均大于SAMP8小鼠，但无显著性差异 （P0.05）；SAMR1小鼠神经元功能和形态好于SAMP8小鼠，表现在神经元体积较大，形态规则，尼氏体致密，无明显空泡变性及噬神经现象，而SAMP8小鼠则神经细胞体积较小，有较多细胞失去完整、规则形态，，尼氏体稀疏，部分缺失，有较明显的空泡变性；SAMP8小鼠海马CA1区、CA3区及颞叶皮质的平均单位面积细胞计数及面数密度、甲苯胺蓝信号（尼氏体）的总面积和积分光度、平均单个细胞截面积、平均CA1区厚度，均小于SAMR1小鼠(P0.01) ,海马星形胶质细胞过度增生(P0.01)，活化的星形胶质细胞与海马神经元数量呈负相关，具有显著性意义；海马CA1区、CA3区及颞叶皮质的bax和bcl-2的表达均增加(P0.01)，以bax的增加幅度更大，bcl-2/bax比值变小。 针刺组全脑长度、宽度及重量与P8组比较无明显差异(P0.05)；小鼠神经细胞 体积大于P8组，但明显小于R1组，形态较规则，尼氏体较致密，无明显缺失和空泡变性；海马CA1区、CA3区及颞叶皮质的平均单位面积细胞计数、甲苯胺蓝信号（尼氏体）的总面积和积分光度、平均单个细胞面积、平均CA1区厚度增加(P0.05)；海马GFAP表达下降(P0.01)；海马CA1区、CA3区及颞叶皮质bax表达下降(P0.01)，bcl-2表达增加(P0.05)，bcl-2/bax比值变大。 结论：“益气调血，扶本培元”针法可以减少或延迟SAMP8小鼠神经元的丢失，其作用机制可能是针刺可以促进神经元蛋白质合成，改善神经元的功能状态和细胞形态，避免小胶质细胞对神经元的吞噬；减少星形胶质细胞的活化与增生；上调细胞存活蛋白的表达，下调细胞凋亡蛋白的表达；减少神经元的死亡，从而减少或延迟了神经元的丢失，维持了中枢神经系统的正常结构和功能，对AD的治疗有积极的作用。 关键词：阿尔茨海默病/老年性痴呆 SAMP8小鼠 海马 颞叶皮质 尼氏体 GFAP bax bcl-2 “益气调血，扶本培元”针法  Abstract Objective: To study the effect of “Yiqitiaoxue, fubenpeiyuan” Acup Therapy on selective neuron lost of Senile Accelerated Mouse (SAM) P8, a model of AD, treated with acupuncture. Observe the number and sharp of neuron in the hippocampus and the cortex of temporal lobe, activation and accrementition of horizontal cell, as well as the expression of apoptosis relative protein. Discusse the possible mechanism of acupuncture in neuroprotective effect. Methods: Altogerher 48 mice of seven-month old male SAMP8 were selected and allocated randomly to three groups: P8 control group, sham-acupuncture group and a