棉花高效再生体系建立及其遗传转化影响______因素的研究本科毕业设计（论文）.docVIP

分类号： 单位代码：10758 密 级： 学 号：2005107 硕士学位论文 新疆棉花高效再生体系建立及其遗传转化影响因素的研究 Study on High Efficiency Plant Regeneration System and the Influence Factors Genetic Transformation of Xinjiang Cotton Varieties in vitro 研究生： 阳立恒 指导教师： 曲延英 教授 合作指导教师： 郝秀英 研究员 申请学位类别： 农学硕士 专业领域名称： 作物遗传育种 研究方向： 植物转基因技术 所在学院： 新疆农业大学农学院 新疆·乌鲁木齐 二○○八年六月独 创 性 声 明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得新疆农业大学或其他教育单位的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。 研究生签名： 时间： 年 月 日 关于学位论文使用授权的说明 本人完全了解新疆农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：新疆农业大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子文档，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文，允许论文被查阅和借阅。本人授权新疆农业大学将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以公布（包括刊登）论文的全部或部分内容。 (保密的学位论文在解密后应遵守此协议) 研究生签名： 时间： 年 月 日 导师签名： 时间： 年 月 日  摘 要 棉花作为世界性重要的经济作物，由于其生长发育期恰好与各种自然灾害的频发季节相重叠，因此对棉花品种性状的要求显得复杂，传统的棉花育种方法发展到今天面临着种质资源贫乏、远缘杂交困难等问题，这就使有益性状的结合，尤其是高产、优质、多抗性状的有机结合十分困难。利用遗传工程技术棉花品种改良的研究越来越受到科学研究者的关注。然而目前棉花生物技术的发展仍然存在着很多障碍，如棉花体细胞胚胎发生的基因型依赖性、棉花组织培养的低效性（耗时、耗工）、基因转化技术的复杂性（难重复，转化率低）和转基因棉花农艺性状的变异等等，这些问题已经成为棉花生物技术、棉花功能基因的验证和棉花相关基因克隆等研究领域的障碍和瓶颈。 针对上述存在的诸多问题，本研究以四种不同的新疆棉花栽培品种为材料，探讨棉花上胚轴离体培养再生植株及农杆菌介导遗传转化的主要影响因素，为培育新种质奠定基础。取得的主要研究结果如下： 1 对供试的四个材料的上胚轴进行处理，采用6-BA和NAA的激素组合，进行多芽诱导，随着6-BA浓度的提高，有部分玻璃化苗的出现经过筛选选取6-BA 0.3mg/L + NAA 0.01mg/L为最佳芽诱导激素组合。2 对供试的四个材料的上胚轴进行处理，采用和NAA的激素组合，进行多芽诱导，6-BA和NAA的激素组合。3 将诱导出的多芽切成单芽后来诱导生根，在供试的6种生根培养基中， 1/4MS + IBA 10mg/L对再生芽的生根效果好，生根率可达以上胚轴为外植体，对棉花建立操作比较简单，系统变异小，遗传稳定性好，周期短，不依赖基因型的直接再生植株方法。 4L乙酰丁香酮的农杆菌重悬液中浸染15 min后共培养2天，经过3天的恢复培养之后用包含50 mg/L卡那L头孢霉素的筛选培养基进行筛选是较为理想的遗传转化条件。 5 经卡那霉素筛选已经获得抗性小植株，取抗性植株叶片在紫外光激发下显示出绿色荧光,初步表明基因存在于中。 关键词：棉花；上胚轴及斩首上胚轴；直接器官发生；植株再生；遗传转化ABSTRACT Cotton is an important economical crop all over the world. Requirement for cotton varities’ characters is complicated, because phases of its grow