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水中藻类检测的方法 姓名：田家宇 专业：市政工程 学号：04s027026 本文主要从以下三个方面阐述了水中藻类检测的方法： 1. 藻类检测和计数新方法——置式显微镜法； 2. 改进的水中藻类检测方法； 3.藻类叶绿素及其降解产物的测定方法。 一、藻类检测和计数新方法——置式显微镜法 由于环境污染，一些湖泊富营养化程度不断加剧，导致水中藻类的快速增长。大量藻类的存在，直接影响了自来水的生产和供应。为了了解藻类对水厂各工艺环节的影响，以湖泊水为水源的许多水厂都相继开展了藻类计数检测项目。国内普遍采用的方法是将1L水样加鲁戈试剂固定在一个容器中，自然沉降24h后，利用虹吸的方法吸去上清液，并浓缩定容到30～50mL，然后取1mL放入血球计数板，在正置式显微镜下进行镜检计数[1]。此方法由于所需的水样较多（1L），在需要采集多个水样时，采集和运送的工作量大;在沉样时还要多次冲洗转移，增加了产生误差的机会，而且操作不便。昆明自来水总公司的水源之一是富化程度较高的滇池水，因而昆明水司较早开展了此项目，并得到了瑞士苏黎世供水局的技术支持和大力帮助。我们所采用的藻类计数方法的特点是使用倒置式显微镜，藻样通过沉样板一步沉降到位，与国内普遍采用的方法相比具有准确快捷，水样用量少，运送方便，无须多次冲洗转移，操作简单等优点，适用于生产和科研检测。 1.用品准备 （1）沉样板。由一个长12cm，宽4.1cm,中央有圆形凹槽（底面积为5cm2）的长方形有机玻璃板和一个可滑动的、底部与凹槽形状完全吻合的空心圆筒（容积为25mL）以及一块圆形盖玻片组成（见图1），有机玻璃板的左侧有一小孔，用于放掉上清液。 （2）倒置式显微镜。与普通倒置式显微镜不同的是，它的载物台经简单改造，增加了一个长方形的金属框，大小恰好可放置沉样板。金属框的作用是将沉样板固定在载物台上，使沉样板可与载物台同步移动，避免沉样板发生偏移。两个目镜，一个装有微型刻度尺，可直接测量藻类的大小和长度，另一个装有“ ”形标尺，在讦数时用它界定讦数范围。 （3）250mL试剂瓶。用于盛装水样。 （4）移液管（1～25mL）。 2.药品准备 ①鲁戈试剂（Lugols Solution）;②福尔马林（40%）;③洒精（50％）。 3.方法与步骤 3.1取样 先在250mL试剂中加入6～7滴鲁戈剂，再加入200mL，左右水样，摇匀。如果水样需保存较长时间，可加入适量福尔马林（40％）。 3.2沉降 用移液管取适量水样加入沉样板，再加入蒸馏水至满，加盖圆玻片，静沉24h。取多少水样，同藻类的多寡而定，藻类数量多可少取，数量少可多取，一般水样体积在1~25mL之间。 3.3计数 将沉样板上的圆筒用盖玻片推开，放掉上清液，置于显微镜上，以目镜上的“工工”形标尺为界线，随机选取若干条带计数。 一般情况是这样计数的；①在10×16倍镜头下，计数全部视野（1cm2）内的大型藻类。②在×25的倍镜下，随机选取5条带，计数基中的中型藻类。③在10×40倍的镜头下，随机选取1条带，计数其中的微型藻类。 在实际运用中，可根据当地的原水藻类情况，确定所选取的条带数。 3.4计算 N= 式中N ——1mL; 5——沉样板板底部圆形凹槽的底面积，cm2; S——每个计数条带的面积，cm2; A——选取的条带数； V——水样体积；mL; N——实际数的A个条带的藻类个数。 将上述三个放大倍数下计数得的藻类依上式分别计算，再相加，即得到藻类总数。 3.5清洗 计数完毕，用蒸留水冲洗沉样板，浸泡于50％的酒精中过认，再次用蒸留水冲洗后，晾干待用。 4.注意事项 （1）沉样前，要将水样摇匀 （2）将沉样板的圆筒推开时，要防止产生气泡。 （3）将沉样板置于显微镜上时，要尽量保持平衡，避免藻类向一侧倾斜。 （4）在选取计条带时，既要注意随机性，又要注意均匀性。 5.实际样品检测 取某水厂原水用上述方法（简称倒置法）和国内普遍采用的传统方法（简称正置法）分别进行藻类检测和计数，结果见表1。 由表1可见，倒置法水样用量少，并有较高的精密度；正置法水样用量多，精密度较低，而且由于正置法使用的血球计数的容积所限（0.1m3），出现在计数框内的藻类种类也有限，如果需要分类计数，有一定局限性，不好操作。倒置法可以一边分类鉴定，一边分类计数，水样中存在的种类在1cm2的计数范围内基本都能看到，分类鉴定和计数的结果比较全面，操作也方便。另外，倒置法将水样一步沉降到位，省略了许多中间环节，减少了多次冲洗 转移带来的操作误差，从而提高了准确度。 6结论 利用倒置式显微镜进行藻类检测和计数的方法，比使用正置式显微镜的血球计数板法水样用量少，中间环节少，准确快捷，精密度较高，在分类鉴定和计数时，操作较为方便。但该方法使用的沉样板国内尚无厂家生产，需