经口毒性实验.docVIP

急性经口毒性试验 Acute Oral Toxicity Test 1 范围 本方法规定了动物急性经口毒性试验的基本原则、技术和要求。 本方法适用于评价化学品的急性毒性作用。 2 规范性引用文件 OECD Guideline for Testing of Chemicals (No. 401. Feb. 1987 ) OECD Guideline for Testing of Chemicals (No. 425. Feb. 2001 ) USEPA OPPTIS Health Effects Guideline (Series 870.1100 June 1996) 3 试验目的 3.1 检测化学品对实验动物的急性毒性作用和强度。 3.2 为亚急(慢)性等毒性试验提供剂量选择的依据。 3.3 试验结果可作为化学品急性毒性分级和标签标识。 ４ 定义 4.1 急性经口毒性(Acute Oral Toxicity): 一次或在24h内多次经口给予实验动物受试样品后，动物在短期内出现的健康损害效应。 4.2 经口半数致死剂量（Oral Median Lethal Dose）: 经口一次或24h内多次经口给予受试样品后，引起实验动物总体中半数死亡的毒物的统计学剂量。以单位体重接受受试样品的质量(mg/kg bw或g/kg bw)来表示。 4.3 剂量-反应关系(Dose-response Relationship)：表示化学毒物的剂量与某一群体中质效应的发生率之间的关系。 5 试验基本原则 以经口灌胃法给予各试验组动物不同剂量的受试样品，每组用一个剂量，染毒剂量的选择可通过预试验确定。染毒后观察动物的毒性反应和死亡情况。试验期间死亡的动物要进行尸检，试验结束时仍存活的动物要处死并进行大体解剖。本方法主要适用于啮齿类动物的研究，但也可用于非啮齿类动物的研究。 6 试验方法 6.1 受试样品的处理 受试样品应溶解或悬浮于适宜的赋形剂中，（不溶性固体或颗粒状物质研磨、过100目筛）建议首选水或食用植物油（如玉米油）作溶剂，也可考虑使用其它赋形剂（如羧甲基纤维素、明胶、淀粉等）等配成混悬液；不能配制成混悬液时，可配制成其它形式(如糊状物等)，但不能采用具有明显毒性的有机化学溶剂。如采用有毒性的溶剂应单设溶剂对照组观察。 6.2 实验动物 首选健康成年小鼠(18g～～20%。试验前动物要在试验环境中至少适应3～5d.3 剂量设计 根据所选方法的要求，原则上应设4～0只动物（雌雄各半），采用5000mg/kg bw剂量，如未引起动物死亡，可不再进行多个剂量的急性经口毒性试验。 6.4 试验步骤 6.4.1 试验前实验动物应禁食（一般16h左右），不限制饮水。若采用代谢率高的其它动物，禁食时间可以适当缩短。 6.4.2 正式试验时，称量动物体重，随机分组，然后对各组动物用经口灌胃法一次染毒。各剂量组的灌胃体积应相同, 小鼠常用容量为20ml/kg bw，大鼠常用容量为10ml/kg bw。若一次给予容量太大，也可在24ｈ内分2～3～3h～4h.4.3 观察期限及指标 观察并记录染毒过程和观察期内的动物的中毒和死亡情况。观察期限一般为14d，观察指标、LD50的计算及试验记录形式分别见附录1-A、1-B、1-D。 对死亡动物进行尸检。观察期结束后，处死存活动物并进行大体解剖，如有必要，进行病理组织学检查。 6.5 可采用多种方法测定LD50，建议采用霍恩氏法、寇氏法、概率单位-对数图解法、最大耐受量试验和上-下法等(见附录1-B)。 7 鉴定报告 鉴定报告应包括如下内容： 7.1 受试样品名称、理化性状、配制方法、所用浓度； 7.2 实验动物的种属、品系和来源（注明合格证号和动物级别）; 7.3 实验动物饲养环境，包括饲料来源、室温、相对湿度、动物实验室合格证号； 7.4 所用剂量和动物分组，每组所用动物性别、数量及体重范围； 7.5 染毒后动物中毒表现和死亡情况及出现时间，大体解剖及病理所见； 7.6 计算LD50的方法及其LD50和95%可信限； 7.7 列表报告结果（建议的表格形式见附录D）； 7.8 结论。 8 试验结果的解释 通过急性经口毒性试验和LD50的测定可评价受试样品的急性经口毒性、急性经口毒性分级，其结果外推到人类的有效性很有限。 亚急性经口（14/28d）毒性试验 Sub-acute Oral Toxicity Test 1 范围 本规范规定了啮齿类动物亚急性经口（14/28d）毒性试验的基本原则、要求和方法。本规范适用于检测化学品的亚急性经口（14/28d）毒性。 2 规范性引用文件 OECD Guidelines for Testing of Chemicals （No.407，July 1995） 3 试验目的 为