高三生物专项复习课件3.pptVIP

(3)延伸：温度上升到72℃左右，溶液中的四种脱氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链，如下图： 6．检测PCR扩增效果 (1)将样品进行50倍稀释：取2 μL PCR反应液，加入98 μL蒸馏水。 (2)以蒸馏水作为空白对照，在波长260 nm处，将紫外分光光度计的读数调节至零。 (3)将步骤①中的DNA稀释液加入到厚度为1 cm的比色杯中，测定其在260nm处的光吸收值(用A260nm表示)。 注意　DNA在260nm的紫外线波段有一强烈的吸收峰，可以利用DNA的这一特点进行DNA含量的测定。  (4)根据下面的公式计算DNA含量。DNA含量(μg/mL)＝50×A260nm×稀释倍数  注意　据测定，1 μg/mL的DNA在厚度为1 cm比色杯中，OD260为1相当于50 μg/mL的双链DNA。以此为标准，可以计算出样品中的DNA浓度。 7．PCR技术的应用 PCR技术模拟细胞内DNA的复制过程，实现对某一段DNA的扩增。PCR技术能在几小时内将极微量的DNA特异性地扩增上百万倍，从而有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究的难题，大大提高了对DNA分子的分析和检测能力，被广泛地应用于基因克隆、基因序列分析、遗传病诊断、古生物学研究以及刑侦破案、亲子鉴定等诸多方面。 4．多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。请回答下列有关PCR技术的基本原理及应用问题。 (1)DNA的两条链是反向平行的，通常将＿＿＿＿＿_的末端称为5′端，当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNA聚合酶就能从引物的＿＿＿＿开始延伸DNA链。 (2)PCR利用DNA的热变性原理解决了打开DNA双链的问题，但又导致了DNA聚合酶失活的新问题。到20世纪80年代，科学家从一种Taq细菌中分离到＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿_，它的发现和应用解决了上述问题。要将Taq细菌从其他普通的微生物中分离出来，所用的培养基叫＿＿＿＿＿＿＿＿＿_。  对位训练 磷酸基团 3′端 耐高温的Taq DNA聚合酶 选择培养基　 (3)PCR的每次循环可以分为＿＿＿＿＿＿＿＿＿三步。假设在PCR反应中，只有一个DNA片段作为模板，请计算在5次循环后，反应物中大约有＿＿个这样的DNA片段。 (4)请用简图表示出一个DNA片段PCR反应中第二轮的产物。  (5)简述PCR技术的主要应用。 变性、复性和延伸 32 遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定(要求3项以上)。 解析 (1)DNA聚合酶只能把新的核苷酸加到已经存在的核酸的3′-羟基上，与DNA母链结合的引物就提供这个羟基。 (2)因PCR利用了DNA的热变性原理解决了打开DNA双链的问题，所以用于催化DNA复制过程的DNA聚合酶要具有耐高温的特性。用选择培养基可将Taq细菌从其他普通的微生物中分离出来。 (3)DNA复制时两条链均作为模板，进行半保留式复制，所以复制5次后得到的子代DNA分子数为25＝32个。 (4)新合成的DNA链带有引物，而最初的模板DNA的两条链不带有引物。 (5)PCR技术可以对DNA分子进行扩增，所以可用于遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定等方面。 排雷　 PCR扩增技术和DNA复制的比较 短时间内形成大量目的基因DNA片段，呈指数增长——2n 形成的是整个DNA分子，一个细胞周期只复制一次 特点 四种脱氧核苷酸 四种脱氧核苷酸 原料 模板、ATP、引物链(DNA及RNA片段)、温度变化(90～95℃→55～60℃→70～75℃) 模板、ATP、引物链(RNA)、常温 条件 耐热的DNA聚合酶(Taq酶) DNA聚合酶、解旋酶 酶 碱基互补配对 碱基互补配对 原理 生物体外 细胞核内 场所 PCR扩增技术 DNA复制 考点132　 生物技术实践应用——植物芳香油的提取 1．植物芳香油的基本知识 (1)成分：组成较复杂，主要包括萜类化合物及其衍生物。 (2)特点：具有很强的挥发性，易溶于有机溶剂。 (3)应用：玫瑰精油是制作高级香水的主要成分，能使人产生愉悦感；橘皮精油的主要成分是柠檬烯，具诱人的橘香味，是食品、化妆品和香水配料的优质原料。 2．玫瑰精油的提取流程与关键 (1)安装装置顺序：从左到右，自下而上。 (2)温度计位置：温度计水银球的上限与蒸馏烧瓶支管的下限处在同一水平线上。 (3)冷凝管中的水