药理学实验要点.docVIP

药理学实验讲义 南方医科大学药学院  目 录 实验一 ……………………………… 2 实验二 ……………………… 4 实验三 ……… 5 实验四 …………………………… 6 实验五 药物镇痛实验…………………………………………… 7 实验六 巴比妥类药物…………………………… 9 实验七 利多卡因对抗氯化钡引起的心律失常实验…………… 13 实验 有机磷酸酯类中毒及解救……………………………… 14 ……………………………………19 附录2 药理学在新药研究中的应用……………………………22 实验一、实验动物操作的基本机能 一、目的：学习实验动物编号、捉持、给药、采血等基本操作方法。 二、实验材料 （一）动物：小白鼠，体重18g ~ 22g。（二）器材：1 ml注射器， ml注射器针头，灌胃针头，大烧杯，天平。 0.1～0.2ml/10g，不超过0.5ml/只。 肌内注射（im）：两人合作，注射部位多选后腿上部外侧。一处注射量不超过0.1ml。 皮下注射(ih)：注射时用左手拇指及食指轻轻捏起皮肤，右手持注射器将针头刺入,固定后即可进行注射。一般小鼠在背部或前肢腋下。注药量一般为0.1～0.2 ml/10g。 腹腔注射（ip）：左手将小鼠握持固定，使其腹部朝上。右手持注射器，取300角从下腹部外侧向头端刺入腹腔，进针部位不宜太高，刺入不能太深。注射量0.05～0.2ml/10g，不超过0.5ml/只。 静脉注射（iv）：将小鼠置于固定筒内，使其尾巴露在外面，用70%酒精涂擦尾部，或将鼠尾浸入50℃水中。待尾部静脉扩张后，左手拉住尾尖，右手进针，注射量不超过0.5m/只。 (2)家兔的给药方法 灌胃：一人将兔身固定于腋下，一手固定兔头，另一手将开口器放入兔口。另一人将导尿管从开口器孔插入口内，再慢慢插入食道和胃。为慎重起见，可将胃管外端放入水中，如无气泡，则可证实导尿管在胃内。灌胃量一般为10 ml/kg。如用兔固定盒，可由一人操作。 静脉注射：一人固定兔身和兔头，另一人在使兔耳边缘血管(耳缘静脉)扩张后，从静脉末端刺入血管，左手拇指和食指固定针头和兔耳，右手注药(图2-10)。注药量一般为2 ml/kg，等渗液可达10 ml/kg。 皮下、肌肉、腹腔注射与鼠类相似。常用注药量分别0.5、1.0、5.0 ml/kg。 5.取血小鼠眼球后静脉丛取血法断头取血心脏取血 (2) 家兔取血的方法 耳缘静脉取血：选好耳缘静脉，拔去被毛，用二甲苯或75％酒精涂擦局部，小血管夹子夹紧耳根部，使血管充血扩张．术者持粗针头从耳尖部的血管逆回流方向入静脉取血，或用刀片切开静脉，血液自动流出，取血后用棉球压迫止血，一般取血量为2～3 ml。 耳中央动脉取血：免置入固定箱内，用手揉擦耳部，使中央动脉扩张。左手固定兔耳，右手持注射器，中央动脉末端进针，与动脉平行，向心方向刺入动脉。一次取血量可达15 ml，取血后棉球压迫止血。注意兔中央动脉易发生痉挛性收缩。抽血前要充分使血管扩张，在痉挛前尽快抽血，抽血时间不宜过长。中央动脉末端抽血比较容易，耳根部组织较厚，抽血难以成功。 家兔的采血还有心脏取血实验二、 不同给药途径对药物作用的影响 (二)不同给药途径对异戊巴比妥作用的影响 1. 取小鼠4只称重、编号，观察正常活动、呼吸状况及翻正反射后，分别给予1%异戊巴比妥溶液0.1ml/20g，甲鼠灌胃，乙鼠皮下注射，丙鼠腹腔注射，丁鼠尾静脉注射。观察比较4鼠给药后表现有何不同，并记录给药后翻正反射消失开始发生所需的时间。 2. 将相关实验数据填入下表，并对结果进行分析讨论。 鼠号 体重 剂量 给药途径 翻正反射消失时间 甲 乙 丙 丁 五、注意事项 掌握正确的灌胃操作技术，不要误入气管或插破食管，前者可致窒息死亡，后者可出现如同腹腔注射的吸收症状，重则死亡。 思考题 不同给药途径在哪些情况下使药物的作用产生质的不同？在哪些情况下则使药物的作用只产生量的不同？ 实验三、全血水杨酸二室模型药物代谢动力学参数测定 目的和原理 药物代谢动力学（harmacokinetics）是研究机体对药物的作用过程及体内药物浓度随时间动态变化的规律，包括药物在体内吸收、分布、代谢（转化）和排泄的特点及影响因素，以及运用数学方法定量地阐明机体内药物浓度随时间变化的规律，求出药物的药代动力学参数如半衰期、分布容积、生物利用度、吸收速率常数、消除速度常数等，为临床用药方案的制定、用药剂量的调控、治疗效果及不良反应的监测等提供理论依据，有利于更好地发挥药物的防治作用，尽量减少和避免不良反应。 药物在体内的变化过程可以用药—时曲线来表示，即以时间为横坐标，血药浓度为纵坐标绘出曲线。利用曲线可以分析并最终阐明该