第十章 动物实验的基本技术和方法.ppt

思考题 安死术 染色法编号标记大原则是什么? 实验结束后各种废弃物如何处理? 兔耳中央动脉取血方法 兔耳缘静脉取血方法 狗颈静脉取血方法 狗股动脉取血方法 猕猴后肢静脉取血方法 肝素:1ml血液内加入20国际单位肝素(1mg等于120单位，市售肝素钠注射液12500单位/2ml约为50mg /ml)即可达到抗凝目的，可将肝素配制成500单位/ml置4℃保存，或于试管内加入100单位肝素液后于80℃烤干备用，后者可抗凝3～5ml血液。 草酸盐合剂(草酸胺1.2g,草酸钾0.8g,甲醛1.0ml) 0.1ml、5%枸橼酸钠液0.1ml、2%草酸钾溶液0.1ml均可使1ml血液抗凝。2.7%EDTA 0.5ml可使10ml血液抗凝。 抗凝剂的应用 消化液采集 (一)胃液的采集 通过刺激，使胃液分泌增加，再用插胃管的办法抽取胃液。 (二)胆汁的采集 采集胆汁需要施行手术。 (三)胰液的采集 胰液的采集基本同胆汁的采集。 尿液采集 (一)代谢笼 动物排便时，可通过笼子底部的大小便分离漏斗，将尿液与粪便分开，达到采集尿液的目的。 (二)压迫膀胱(强制排尿) 将动物固定，按压骶骨两侧的腰背部或轻轻压迫膀胱的体表部位，使其排尿。 处死安乐死:使动物在尽短大时间内没有痛苦没有恐惧地死亡大方法. 原则：时间短、痛苦少 处死方法化学药物：二氧化碳，三氯甲烷 乙醚，氯化钾，乙醇脱臼断髓：颈椎脱臼空气栓塞：兔40ml,狗100ml急性失血：大动物麻醉 股动脉放血 小鼠颈椎脱臼处死法 动物实验后的管理方法 一、动物实验后的护理 (一)注意饮食卫生 (二)细心护理，防止意外损伤 (三)控制好受试动物的环境 二、动物实验的描述 (一)标题中实验动物种名的记述 论文题目是该项研究的核心。许多情况下，应描述实验动物的种（品系）名。 (二)实验动物的品种(系) 应准确描述实验动物的品种或品系名称，避免使用通俗称谓。 (三)实验动物的来源、遗传背景及微生物学质量 动物从何处获得属于遗传学分类（近交系、突变系封闭群、杂交群）中的哪一类，属于微生物学质量分级（普通级、清洁级、SPF级、无菌级）中的哪一级，必须规范叙述。 (四)动物性别 动物性别对某些实验结果影响较大，因此必须描述动物的性别。 (五)动物年龄、体重 实验者应向实验动物供应单位索取，询问清楚。 (六)动物饲养方式 应对动物饲养方式，如饲料种类、饲料来源、饲料合格证号、饲喂方式、饮水方式、饲养密度、笼具与垫料种类、更换次数、清扫频率，甚至使用哪一种材料的笼盒都应叙述清楚。如若是因实验需要自制的饲料，应叙述饲料成分和配制方法等。 (七)实验环境 实验观察环境（如温度、湿度、光照度、光照周期、噪音、环境洁净度）、动物饲养环境的级别以及相应级别的动物实验条件合格证号码与颁布单位等应作出尽可能的描述。如若是清洁级以上的条件，还应叙述换气次数。 (八)实验动物和动物实验条件合格证 目前我国实施实验动物合格证制度，并以法令形式作出规定。实验者在论文中应记述所使用动物和动物实验条件的合格证号码及颁发合格证的单位。 (九)使用的麻醉剂 动物施行麻醉术时，有些实验应记述所使用的麻醉剂种类、剂量、麻醉方式和给药途径等。 (十)施加实验因素所采用的方式 如“经口灌胃”、“腹腔注射”等。 (十一)处死方法 在有些需处死后采集标本的实验中，应标明动物的处死方式。 动物实验后废弃物的无害化处理 一、组织管理 在各单位实验动物管理委员会的指导下，所属的动物实验中心（或室）对废物的无害化实行专人领导和专人负责制，并制定相应的规章制度强化动物实验中的废弃物的无害化处理的管理。 二、污水的无害化处理 动物实验中的污水来自动物的尿粪液、笼器具洗刷、废弃的消毒液、实验中的废弃的试液等，并且使用量大。 实验室排出的污水应首先集中在贮水池中进行消毒。 如果是做动物感染实验所产生的污水，必须先彻底灭菌后方可排入污水储水池进行消毒。 三、污物的无害化处理 （一）在动物中心领导下，实行专人管理和处理 （二）分类收集 1．污物应分类收集，实验动物废垫料与实验废弃品要分开，不得混放。 2．实验后收集的污物不得直接向垃圾道内倾倒，污物要用污物处理容器，进行盛装。然后汇总于专用污物袋中进行一次性封闭处理。 3．有机垃圾盛装器应密封有盖，防渗漏、防