enzymologyc蛋白质浓度测定资料讲解.ppt

人有了知识，就会具备各种分析能力， 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书，广泛阅读， 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识， 培养逻辑思维能力； 通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平， 培养文学情趣； 通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操， 给我们巨大的精神力量， 鼓舞我们前进。 * * * 首先了解样品的性质一般性质：试样的体积、酶（蛋白质）和杂质的量、试样的pH及离子强度酶的物化特性：大小、pI、S(solubility)、亲水性、化学性质酶的生化特性：稳定性、辅助因子 第六节 酶纯化步骤的设计 考虑相容性A.开始阶段样品体积、数量大 首先考虑高容量capacity，其次高分辨率resolution处理量小时则反之B.盐析后盐浓度高，影响离子交换色谱和电泳，需先进行透析或凝胶过滤脱盐。 1.分离方法的顺序 C 分离的每个步骤选择不同性质的分离方法 D 最后分离条件注重复原性、快速，因为蛋白质越纯稳定性下降越快。 2.初步纯化一般注意点：A. 温度B.避免极端I,pHC.有机溶剂D.蛋白质的浓度（高 稳定，因为蛋白质带负电，排斥力大）E.避免泡沫和膜的形成F.酶的活性 6.纯化步骤的定量评价 3.选择性的纯化步骤 色谱法 4.检查纯化的进展情况