凝胶过滤资料讲解.pptVIP

内容提要 第一节 凝胶的分类及其性质 第二节 基本原理 第三节 操作 第四节 应用 第三节 操作 一、凝胶的选 择与处理 凝胶的选择； 凝胶的处理； 凝胶用量的计算 型号选择 粒度 克＝ Л r h 膨胀度（床体积／克干重） 2 1.漂去破、碎的凝胶； 2.凝胶的充分溶胀，沸水浴或真空泵抽气。 凝胶颗粒大小对分辨率的影响 分辨率：粗颗粒劣于细颗粒；更劣于超细颗粒。 核苷酸在不同大小凝胶颗粒中的洗脱图谱 二、凝胶柱 的制备 柱子的选择； 柱子的填装； 柱子的鉴定 平衡 柱子直径与长度比例、流速与分辨率的关系 加样量与洗脱峰及分辨率的关系 三、加样与洗脱 加样 洗脱 加样量的控制原则 定性目的：依据检测器的灵敏度确定，紫外检测蛋白质，加样量为Vt的1％～5％。（凝胶过滤会将样品稀释2～3倍 ），须对样品进行适当的浓缩。 制备与脱盐：在不影响分辨率时，尽量加大样品体积，可达床体积的20～30％；加样量根据分配系数Kav或洗脱体积Ve确定。 A B VeA VeB A、B两洗脱物体积之差为分离体积Vs，