1260操作规范及注意事项.docVIP

安捷伦液相操作规程及注意事项 开机 接通电源，打开计算机，进入windows操作系统 检查色谱柱型号是否正确及进出口有无接反 检查流动相是否正确，溶剂是否够用 打开主机各模块，待其完成自检后，双击桌面联机系统(online)，单击view，选择方法和运行控制画面 排气：逆时针旋转排气阀60-90°，右击四元泵图标出现快捷键，点击method选项进入泵编辑画面。将泵流量设到5 mL/min，溶剂A设到100%，打开泵，排出管线中的气体2-3分钟，直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止，查看柱前压力（若大于10 bar，则应更换排气阀内过滤白头）。切换到B、C、D分别排气 将泵流量设为0.5 mL/min设定溶剂配比，关闭排气阀。随后将泵流量设为0.8 mL/min，2 min后设为1 mL/min，冲洗柱子20-30 min 采集方法编辑 编辑样品信息 ——使柱温箱的温度左右一致。 VWD检测器参数设定：在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长，如254 nm，在“峰宽(响应时间)”下方点击下拉式三角框，选择合适的响应时间，如0.1 min (2s)，再设置“停止时间”和“后运行时间”。 仪器曲线设置：默认即可。 关机 关机前，用95%水冲洗柱子和系统15-30 min，流量0.5-1 mL/min，再用100%有机溶剂冲0.5 h，然后关泵退出化学工作站，及其它窗口，关闭计算机（用shutdown关） 3. 关掉主机电源开关。(泵（排气阀拧60°即可，不能过大，最大不超过90°。排气时流速设为5时会有少量液体流出）(流通阀（此台高液采用的是被动阀，被动阀的优点是耐用，但是当流速小于0.5 ml/min时性能不如主动阀）(进样器(柱温箱（流动相进柱前可预热，预热体积可为3 ul、6 ul、9 ul。预热流动相的好处是使流动相与色谱柱温差不至于太大，减少气泡的产生，减少鬼峰的出现，使色谱峰保留时间稳定。左右两边的加热板温差不能相差太大，一般设为等值）(检测器（氘灯紫外，钨灯红外）。 阻尼器的作用：维持恒定的流速，减小脉冲。 五、DAD DAD检测器（流通池）中液体的流速应最好小于2 ml/min，最大不能超过4 ml/min；而蒸发光检测器流速一定要小于2 ml/min，流速越大，则在漂移管中产生的液滴越大，越难蒸发，容易造成积水； 六、ELSD ELSD检测器主要用于分析检测半挥发性的物质，但所分析的样品的挥发性要低于流动相，且流动相不能用盐，因为盐难挥发。检测原理：首先柱洗脱液在雾化器中雾化形成气溶胶（雾化气体为N2），然后气溶胶中的挥发性成分在加热的漂移管中蒸发，在漂移管里，气溶胶中大的液滴从废液管排出，悬浮于流动相蒸汽中的样品颗粒从漂移管进入到光散射检测池。在检测池中，样品颗粒散射激光光源发出的光而蒸发的流动相不散射。散射光被检测，产生电信号最后被转化为数据显示出来； 蒸发光散射检测器所用第一瓶氮气一定要纯氮，以后可用95%氮气；Filter为1 s，虽然Filter值越大基线越平，但图像会失真。Gain值6-7。Offset值大于1100的话ELSD则采集不到信号了。清洗蒸发光检测器的方法：将样品管拔掉，开氮气半个小时即可； 连接漂移管的那根废液管要向下，不能向上，且放入废液瓶中时不能泡在液面中，以防堵塞，废液瓶中液体不能超过2/3，这根废液管是分流用的； 蒸发光检测器用于检测没有紫外吸收的检测半挥发性物质； 先开氮气罐通气，再开用流动相；且氮气的压力为3.5 Bar； 排气阀拧60°～90°即可，不必过大； ELSD检测器的废液管出口不能泡在废液瓶中的液面以下，以防堵塞，废液瓶中液体不能超过2/3，这根废液管是分流用的； 雾化器前有连接N2的管道，在N2的入口有个滤膜，用来过滤N2中的微粒物。漂移管中分流的那根管道不能连接的太靠外，否则分流太多，使样品不能进入检测池； 清洗漂移管时，不能使劲擦洗或超声，以免将其损坏； 雾化器前有连接N2的管道，在N2的入口有个滤膜，用来过滤N2中的微粒物。漂移管中分流的那根管道不能连接的太靠外，否则分流太多，使样品不能进入检测池。 冷冻的最低温度为4℃，它的冷冻方式为气冷，即通过从下向上吹冷风的方式进行冷冻，故会有冷凝水流出。冬天室温过低时会有结冰的现象，此时应该先加热，使冰融化，再进行实验； 开ELSD，按▼键，压力：3.5 bar(+、-可切换单位)，温度：55 ℃；雾化管会脏，用软刷清洗，切勿超声，安装时要推到底部再小心安装，小心打破；流动相不用盐，否则会堵，此外，盐粒散射光，影响检测效果用过之后，用气吹15-30分钟，防止残留损坏柱子；不用ELSD时，拔下连接管，用PK头堵上，以保持洁净ELSD开机时，先开气，再开流动相程序进样，不用一定不要选氘灯是易耗品，应最后开灯，不分析样品