黄瓜多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白的诱导表达和活性测定解析.docVIP

黄瓜多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白的诱导表达和活性测定 摘 要 瓜类枯萎病又称萎蔫病，是黄瓜、冬瓜、节瓜、苦瓜、甜瓜、西瓜等主要瓜类的常见病害，引起瓜类枯萎病的病菌主要为尖镰孢菌,属半知菌亚门,其在不同的瓜类作物上表现出不同的专化型。病原真菌侵染植物遇到的第一道防线是植物的细胞壁，针对细胞壁中的每一种多糖成分，植物病原真菌都有相应的降解酶对其进行降解，如果胶酶，纤维素酶，半纤维素酶等。果胶酶是复合酶，根据底物的不同可以分成许多类，其中多聚半乳糖醛酸酶（Polygalacturonase，PG）是一类参与果胶降解的酶。它能够随机地在不同部位水解切开非甲基化的果胶或多聚半乳糖醛酸的α-1,4-糖苷键而导致细胞壁降解及植物组织软化，原生质体死亡，是重要的致病因子。瓜类枯萎病菌尖孢镰刀菌分泌的PG酶能够裂解胞间层果胶，引起瓜类维管束又内向为腐烂坏死。同时，为其他细胞壁降解酶等致病因子的作用提供了条件，从而加速枯萎病病程的扩展。 在植物与病原菌长期相互作用的过程中，植物相应地产生了一些能够抑制病原菌PG活性的因子，其中以多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白（Polygalacturonase- inhibiting protein，简称PGIP）为主，多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白（PGIP）在阻止病原物的侵入、发展，进而激活特定的防卫反应方面具有独特的作用。植物在受到许多生物或非生物因素胁迫时，PGIP将被诱导表达。本文通过对黄瓜健康的瓜苗进行诱导，用还原糖法检测经三种诱导处理不同时间的黄瓜组织中PGIP对黄瓜枯萎病菌粗PG的抑制活性。通过实验观察研究黄瓜PGIP在哪种条件因素下的诱导表达的抑制活性最好，及其对6种枯萎病菌PG活性的抑制作用以及它在不同温度下的抑制活性，从而了解PGIP诱导抗枯萎病的作用机制。实验结果表明黄瓜PGIP经孢子诱导的比活力明显高于SA诱导和黑暗诱导，且在48h时表达量最高。它对6种枯萎病菌PG活性均有较好的抑制作用，且在15℃、30℃、45℃、60℃、75℃、90℃的不同温度下，黄瓜PGIP的抑制活性也不同，其中在30℃时，抑制活性最高。 关键词：PGIP PG 诱导 抑制 黄瓜 The Inhibitory Activity Detection of The PGIP of The Cucumbers Abstract: Melons blight is also called Fusarium Wilt, it is the main common disease of the cucumbers、the white gourds、the zucchinis、the bitter gourds、the muskmelons and the watermelons. The Fusarium oxsporum Schlecht is main germs to cause the Melons blight, it belongs to the Deuteromycotina, and it expresses the different specialized form in different melon crops. Plant pathogenic fungus infection met the first line of defense is plant cell walls，it has corresponding to the degradation of the enzyme degradation for each of the cell wall polysaccharide composition, for example, the pectinous, the cellulose enzyme and so on. Pectinous is the composite enzyme, it can be divided into many classes according to the different substrate, and more than half of clustering lactose is a kind of hyaluronic acid enzymes in the degradation of pectin enzymes.It can cut pectin or alpha acid half lactose 1, 4-glycosidic bond randomly in different parts of the hydrolysis of methylation, which wil