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温度敏感型纳米载体的构建与评价 中文摘要 中文摘要 研究目的：考察具有阳离子型和温度敏感性的泊洛沙姆壳聚糖接枝物纳米胶 束的理化性质，并探讨影响模型抗原的巨噬细胞与树突状细胞摄取的因素，以便 为新型疫苗载体的研究提供实验依据。 丁二酰亚胺(NHS)介导反应，合成泊洛沙姆硫聚糖接枝物，通过核磁共振图谱 见分光光度法测定了接枝物的临界胶束浓度(CMC)和最低临界溶液温度(LCST)。 采用直接分散法制备含OVA的聚合物纳米胶束，BCA法测定纳米胶束的载药量和 包封率，并以粒径、载药量和包封率作为指标筛选工艺与处方。探讨纳米胶束在 37。C和40C条件下的体外释放行为，并通过MTT法考察泊洛沙姆壳聚糖接枝物的 细胞毒性。体外诱导小鼠骨髓中单个核细胞使其分化形成树突状细胞，通过荧光 显微镜和流式细胞仪考察巨噬细胞和树突状细胞对纳米粒的摄取情况。 实验结果：红外光谱图和核磁共振分析结果确证了中间体及泊洛沙姆壳聚糖接 枝物的合成，热分析结果进一步验证了泊洛沙姆壳聚糖接枝物的形成。当 h 0C条件下4 mV。负载OVA的胶束在37。C条件下的4h累积释放为30％，但在4 即可达到释放完全。MTT结果表明，聚合物胶束的细胞毒性低。荧光显微镜和流 式细胞仪的结果显示，巨噬细胞和树突状细胞对FITC-OVA纳米胶束的摄取率明 显高于溶液态FITC-OVA。 结论：泊洛沙姆接枝壳聚糖形成的纳米胶束具有温度敏感性和阳离子特征，且 细胞毒性低，可显著提高所负载模型抗原FITC-OVA的抗原递呈细胞摄取率。以 提高Po-CS胶束的树突状细胞靶向为目的的单克隆抗体修饰J下在进行中。 关键词：泊洛沙姆；壳聚糖；聚合物胶束；巨噬细胞；树突状细胞 作 者：朱丽 指导教师：崔京浩 Abstract andevaluationofthermosensitivenanocarriers Preparation of andevaluation Preparation nanocarrlers Abstract orderto evidencestothe of Objectives：Inprovideexperimental development novelvaccinecarrier ofpoloxamergrafted systems，thephysicochemicalproperties andthermosensitivecharacteristiesandfactors chitosannanomicelleswithcationtic were the of anddendriticcelles investigated． affecting macrophages uptake was EDCandNHSmediated