ObservationandspecimenpreparationofsalivaryglandchromosomesaboutDrosophilamelanogaster分析报告.pdf

果蝇唾腺染色体标本的 制作和观察 上海交大生命学院 一、学习目的 练习取出果蝇幼虫唾腺的技术和制作 唾腺染色体标本的方法。 了解体细胞染色体联会现象，观察果 蝇唾腺染色体的形态特征，并根据唾 腺染色体上带纹的形态和排列，识别 不同的染色体。 识别染色体结构变异的细胞学表现。 练习绘制多线染色体图 二、实验原理 本世纪初 ，D.Kostoff用压片法首 先在果蝇（Drosophila melanogaster ）幼虫的唾液腺细胞 核中发现了特别巨大的染色体——唾 液腺染色体（salivary gland chromosomes ）。由于它具有许多 重要特点而成为细胞遗传学、发生遗 传学、进化遗传学和分子遗传学研究 中不可多得的好材料。 三、实验用品 （一）实验材料 果蝇的三龄幼虫若干。 （二）实验器具 生化培养箱、高压灭菌锅、双筒解剖镜、显微镜、 眼科镊、解剖针、培养瓶、量筒、载玻片、盖玻片、 棉塞、纱布、橡皮筋、玻棒、烧杯、滤纸。 （三）药品试剂 0.7 ％氯化钠（NaCl ），1mol/L HCl ，改良苯酚品 红染色液，蒸馏水，二甲苯，香柏油，果蝇培养基 等。 四、实验操作 （一）幼虫培养 • 获肥大三龄幼虫 （二）取唾腺 • 一对半透明茄子状腺体 （三）解离 • 1N HCl处理 （四）漂洗 • 蒸馏水漂洗三次 （五）染色 • 改良苯酚品红处理 （六）压片 • 使染色体伸展分散 （七）镜检 • 先低倍镜后高倍镜观察 果蝇的生活史：成虫-卵-幼虫-蛹。整个生活史所需时间 在20-30天左右，与温度、湿度、食物等因素有关，因种而异。 成虫：羽化1-2天后进行交配，一般 一生仅交配一次，数日后雌虫产卵。 成蝇寿命一般1-2个月。 卵：椭圆形或香蕉状，长约1mm，乳 白色。常数十至数百粒堆积成块。在 温度较高时，卵产出后一天即可孵化。 幼虫：俗称蛆。圆柱形，前尖后钝， 无足无眼，多呈乳白色。幼虫分3龄， 腹部第8节后侧有后气门1对，由气门 环、气门裂和钮孔组成，是主要的呼 吸孔道。后气门形状是幼虫分类的重 要依据。 蛹：为围蛹，即其体外被有成熟幼虫 表皮硬化而成的蛹壳，圆筒形，棕褐 色至黑色。夏秋季蛹一般3-6天羽化。 （一）幼虫培养 实验前的两个星期，每一个培养瓶放 1 ～2对果蝇（♀、♂），控制产卵数量， 18 ～20℃条件下饲养。幼虫要生长肥大，才 能获得较大的唾腺。 培养要求：