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， （） ，
河 南农业科学 ， ： ７
０１４４３ １ ９ ３８３
２ ６－
ＪｏｕｒｎａｌｏｆＨｅｎａｎＡ ｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ
ｇ
棉花黄萎病菌Ｔ ＮＡ插入突变体库的构建及
Ｄ
－
致病缺陷突变体筛选
＊ ＊
， ， ， ，
谷素静 汪 敏 桑 茜 赵 静 李洪连
（ ， ）
河南农业大学植物保护学院 河南郑州 ４
５０００２
摘 ： （ ） ，
要 大丽轮枝 菌 Ｖ ｄ 侵 染 引起 的棉 花 黄 萎病是 棉 花 生产上 的重要 病害 之 一
ｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ａｈｌｉａｅ
， ， 为材 ，
而其致病的分子机制尚 不清楚 为此 以强致病 力 落叶型黄萎病菌 ＦＧＨ 料 利用农 杆 菌介导
２
转化技术构 建棉 花黄萎病菌 Ｄ 插入 突变体库 并进行 致病缺 陷 突变体 的 筛选 。 当农 杆 菌与黄
Ｔ ＮＡ
－
、 、 ／ 、
萎病菌分生 孢 子 浓度比 为 ２５０∶１ 承 载 介 质 为 ＮＣ膜 乙 酰丁香酮 浓度 ４００ ｍｏｌ Ｌ 共 培 养 时 间
μ
６
， 个分 。 ，
４８ｈ时 转化 效 率 高达每 生孢子产生 个转化子 通过 采 用优 化后 的转化 体 系 构 建
１０ ６１２．５
了含 个 Ｄ 插入 转化子的棉 花黄萎病菌 突变体库 。利用 苗期分生 孢 子 蘸根法 测 定
００ Ｔ ＮＡ ３００
１２ －
， 、 、 ，
个转化子在棉 花 幼苗上 的致病 力 获得 个致病 力显 著降低 的 突 变体 ８１ ５４６ １００９ 其 中 ５４６
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