植物乳杆菌HE-1在共培养中产抑菌物质和LuxS%2fAI-2群体感应现象关系研析.pdfVIP

植物乳杆菌HE-1在共培养中产抑菌物质和LuxS%2fAI-2群体感应现象关系研析.pdf

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摘 要 本研究使用的乳酸菌菌种均分离自内蒙古锡盟地区的酸马奶酒中,第一,使用 plantarum HE-432进行筛选,同时筛选出用于后续检测试验的最 HE.1和Enterococcusfaecium 佳指示菌;第二,选用相近或不同种属乳酸菌作为环境中的刺激因素,设计14个 共培养组合,使用打孔法检测混菌培养上清液的抑菌性;第三,对于具有抑菌性的 混菌培养上清液进行越.2信号分子检测,寻找AI.2信号分子产生与发酵产生抑菌 物质二者之间在时间和产生量上的对应关系;第四,对产抑菌物质乳酸菌生物膜生 成和群体感应现象二者关系进行探索,为以后将其开发为肠道益生菌打下基础;第 五,使用分子生物学手段验证产抑菌物质乳酸菌含有luxS基因片段,辅助证明AI.2 HE.1产生的抑菌物质对肠球 信号分子的产生。实验结果显示,第一,L.plantarum 菌、发酵乳杆菌、植物乳杆菌、乳酸乳球菌、乳酸片球菌、金黄色葡萄球菌、枯草 芽孢杆菌、大肠杆菌和藤黄微球菌均有不同程度的抑制作用,并选取抑制作用最好 的大肠杆菌作为后续实验的指示菌。第二,在l5个共培养组合诱导产抑菌物质实 验中,L,plantarumHE.1与11个组合产生的抑菌物质可以抑制指示茵生长,其中 与Efaecium HE-1与肠球菌、发酵乳杆菌、植物乳杆菌、乳酸乳球菌、乳酸片球菌、金黄色葡 萄球菌和枯草芽孢杆菌共培养均可以诱导产出抑菌物质;11个共培养组合诱导产生 抑菌物质的时间有lO个发生在9h,其中L.plantarumHE.1单菌液体培养不产生抑 菌物质。第三,4个共培养可以诱导抑菌物质产生的组合均于9h处产生AI.2信号 分子,并在6h到15h范围内形成一个小峰,且9h处甜一2信号分子的相对荧光强 度均大子厶plantarumHE-l单独培养时在9h处产生的越。2信号分子量。从抑菌物 质和砧一2信号分子产生的时间与数量的对应关系上看,其二者存在相关关系。第 四,L.plantarum HE一1的生物膜生成时间和生成量与AI.2信号分子的产生时间和产 生量非常吻合,luxS基因成功扩增,同源性分析显示L.plantarumHE.1与已知植物 HE.1生物 乳杆菌luxS基因同源性高达99%以上。分析实验结果得出L.plantarum 膜生成与AI-2/LuxS群体感应系统二者之间有密切的关系,并且luxS基因的扩增成 功和同源性分析从分子生物学上验证了厶plantarum HE.1具有产生AI.2信号分子 的关键基因。 关键词:乳酸菌;共培养;抑菌物质;LuxS/AI.2群体感应系统 Between ofAntibacterial on Production studyRelationship Substancesand Mediated in LuxS/AI.一2 QuorumSensingSystem HE··1 WithLABs Lactobacillus Co··culture plantarum Abstract in of inInner LABsusedthis wereisolatedfromkoumiss study

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