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三 参考值 男:120-160g/L(12-16g/dL) 女:110-150g/L(11-15g/dL) 儿童:120-140g/L(12-14g/dL) 一 、红细胞计数 操作步骤 1 稀释液的配制:NaCL1.0g、Na2SO4·10H2O5.0g、HgCL20.5g以蒸馏水稀释到200ml。溶解后加伊红水溶液1滴,过滤后用。 2 取小试管1支,加红细胞稀释液2.0ml。 3 用清洁干净微量吸管吸取抗凝血10ul。 4 擦去管尖外部余血,轻轻吹入红细胞稀释液底部,再轻吸上层清液喇洗吸管2-3次,然后立即混匀。 5 充池后待3-5min,用高倍镜依次计数中央大方格四角和正中共5个中方格内的红细胞,按数上不数下,数左不数右的原则进行目视计数。 6 计算:红细胞数/L=N(5个中方格内红细胞数)×25/5×10×200×106=N×1010=N/100×1012 参考值 男: (4.0~5.5)×1012/L 女:(3.5~5.0)×1012/L ?新生儿:(6.0~7.0)×1012 /L 注意事项 1.釆血时不能挤压过甚,以免混入组织液 2.如无上述稀释液时,也可用新鲜配制的等渗盐水代替 3.正常数值范围内,两次红细胞计数相差不得超过10% 4.不允许血红蛋白浓度来折算红细胞数 三 、白细胞、血小板计数 操作步骤 1取小试管1支,加血小板稀释液0.38ml。 2 用清洁干净微量吸管吸取抗凝全血20ul。 3擦去管尖外部余血,轻轻吹入红细胞稀释液底部,再轻吸上层清液喇洗吸管2-3次,然后立即混匀,混匀后静置10分钟。 4.1)充池后待2-3min,用高倍镜依次计数中央大方格四角和正中共5个中方格内的血小板,按数上不数下,数左不数右的原则进行目视计数。 2)充池后待2-3min,用高倍镜依次计数四周大方格的白细胞,按数上不数下,数左不数右的原则进行目视计数 5计算: 1)血小板数/L=N(5个中方格内血小板数)×5×10×20×106=N×109 2)白细胞数/L=N(4个大方格内白细胞数)/4×10×20×106=N/20×109 注意事项:1)加盖玻片影响:WHO推荐采用“推式”法,此法较“盖式”法更能保证充液体积的高度为0.10mm。 2)充池影响: ①充池前充分混匀白细胞悬液,避免气泡。 ②充池应避免充液过多、过少、断续,避免气泡及充液后移动盖玻片。3)计数室内细胞分布要均匀:白细胞总数在正常范围内时,各大方格间的细胞数不得相差11个以上。2次重复计数误差不超过l0%。 2. 白细胞分类 1. 白细胞计数 五分类 白细胞 三分类 血细胞分析仪 近年来,随着血液分析仪在国内检验科迅速普及,使血常规检验的参数逐渐增多,不仅提高了工作效率和工作质量,而且为临床医生提供了更广泛的参考数据。血液分析仪的白细胞分类计数,先后推出了两分类、三分类、四分类和五分类的仪器。应该说血液分析仪的飞速发展,使血常规检验进入了新阶段,这是医学检验的一大进步。 血细胞分析仪基础---库尔特原理 白细胞分类原理 1.电阻抗法 电阻抗法白细胞计数原理是根据血细胞非传导性的性质,以对电解质溶液中悬浮颗粒在通过计数小孔时引起的电阻变化进行检测为基础, 进行白细胞计数和体积测定。 白细胞直方图:两个明显分离的峰:左峰:小细胞群(淋巴细胞:35-90fl),两峰之间:中间细胞群(中间细胞:90-160fl)的分布。右峰:大细胞群(粒细胞:160-450fl) 三分类: 通过电阻抗型血细胞分析仪测量细胞体积,将白细胞分为三群。 各警示标志说明 R1:大血小板,血小板团,有核红细胞,疟原虫, R2:异型淋巴细胞,原幼稚细胞,单核细胞,嗜酸细胞,嗜碱细胞。 R3:单核细胞,嗜酸细胞,嗜碱细胞,原幼细胞 R4:中性粒细胞过多。 五分类: 中性粒细胞 嗜酸性粒细胞 嗜碱性粒细胞 淋巴细胞 单核细胞 电阻抗法 光散射法:激光与化学法、容量、电导、射频法 各种仪器对异常白细胞不能完全识别,遇仪器分析有异常提示或疑为血液系统疾病者,需制备涂片,染色后镜检,观察细胞形态及分类。 白细胞计数 计数各类白细胞的百分比 计数各类白细胞的绝对值 5种白细胞各自生理功能存在差异,不同病理情况引发各种白细胞数量和质量的改变。 对疾病的诊断有重要的参考价值 白细胞计数 白细胞分类计数 白细胞形态学 计数: 成人:4.0~10.0×109/L (4000-10000/μL) 儿童:5.0 ~ 12.0×l09/L (5000-12000/μL) 6个月~ 2岁婴儿:11.0 ~ 12.0×109/L (11000-
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