Catalase-TAT的融合表达与表征.pdfVIP

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Catalase-TAT的融合表达与表征.pdf

( ) 40 5 福州大学学报 自然科学版 Vol. 40 No. 5 第 卷第 期 2012 10 Journal of Fuzhou University (Natural Science Edition) Oct. 2012 年 月 URL :http :/ / www. cnki. net / kcms / detail / 35 . 1117 . N.. 1551. 010 . html 文章编号:1000 - 2243 (2012)05 - 0684 - 06 Catalase - TAT 的融合表达与表征 , , , , 李仁宽 孙立国 吕元辉 刘树滔 饶平凡 ( , 350108) 福州大学生物科学与工程学院 福建福州 : RT - PCR (catalase) , PCR TAT 摘要 利用 技术从人的肝细胞中克隆出成熟蛋白过氧化氢酶 的基因 通过 将其与 (catalase - TAT); catalase - TAT pET21a (+ ) , 基因融合形成融合基因 将 基因构建到表达质粒 中 转入大肠杆菌 Rosetta2 (DE3); IPTG , catalase - TAT . 通过 诱导 转化子成功表达出 融合蛋白 重组菌发酵菌体破碎液经过硫 Sp - 5pw , , 18. 51 ; 酸铵沉降和 阳离子交换色谱 分离得到电泳纯的目的蛋白 其纯化倍数为 倍 经理化性质分析 pH ; catalase - TAT 确定了此融合蛋白的最适 和温度稳定性 细胞实验表明融合蛋白 能够明显提高胞内的过氧 化氢酶活性. : ;TAT ; ; 关键词 过氧化氢酶 融合表达 表征 中图分类号:Q815 文献标识码:A Fused - expression and characterization of catalase - TAT LI Ren - kuan ,SUN Li - guo ,L Yuan - hui ,LIU Shu - tao ,RAO Ping - fan (College of Biological Science and Technology ,Fuzhou University ,Fuzhou ,Fujian 350108 ,China) Abstract :Human catalase gene was amplified from

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