乳房炎奶牛金黄色葡萄球菌毒素基因的检测及pfge分型研究.pdfVIP

畜牧兽医学报 ， （）： ２０１１４２７ ９７４９８０ 　 犃犮狋犪犞犲狋犲狉犻狀犪狉犻犪犲狋犣狅狅狋犲犮犺狀犻犮犪犛犻狀犻犮犪 乳房炎奶牛金黄色葡萄球菌毒素基因的检测 及犘犉犌犈分型研究 １ ２ ３ ３ １ １ １ 王 新 ，韦艺媛 ，张 静 ，周 婷 ，梁珍娟 ，杨保伟 ，席美丽 ， 　 　 　 １ １ ２ 夏效东 ，孟江洪 ，俞 英 　 （ 西北农林科技大学食品学院，杨凌 ， 中国农业大学动物科技学院， １． ７１２１００ ２． 北京 ； 西北农林科技大学动物医学院，杨凌 ） １００１９３３． ７１２１００ 摘 要：作者针对临床及亚临床乳房炎奶牛乳汁中金黄色葡萄球菌分离株的毒素基因进行检测和脉冲场凝胶电泳 　 （ ）基因分型，比较 种类型乳房炎金黄色葡萄球菌分离株的差异。无菌法采集奶样，采用国际标准方法从中 ＰＦＧＥ ２ 分离金黄色葡萄球菌，用多重 方法扩增 基因和 基因以确证金黄色葡萄球菌（ ）和耐甲氧西林金黄 ＰＣＲ 狀狌犮 犿犲犮犃 ＳＡ 色葡萄球菌（ ）。进一步用 方法检测 的各种毒素基因（ 、 、 和 基因等）。利用限 ＭＲＳＡ ＰＣＲ ＳＡ 犛犈狊犈犜狊犜犛犛犜１ 犘犞犔 制性内切酶 犛犿犪Ⅰ对 ＳＡ基因组 ＤＮＡ进行酶切和 ＰＦＧＥ分析，最后利用 ＢｉｏＮｕｍｅｒｉｃｓ软件进行聚类分析。结果： （ ／ ）的临床乳房炎奶样和 （ ／ ）的亚临床乳房炎奶样确定为金黄色葡萄球菌阳性样品，分别 １９．３％ ２３１１９ １４．８％ ２６１７６ 从中分离鉴定出 株和 株金黄色葡萄球菌，其中临床乳房炎分离株中有 株为 基因阳性。临床乳房炎 ４３ ２６ ５ 犿犲犮犃 奶牛奶样中检测到 的 、 、 、 和 毒素基因，检出率分别为 （株）、 （株）、 ＳＡ 犛犈犃 犛犈犅犛犈犇 犛犈犑 犘犞犔 ３．８％ １ １１．５％ ３ １９． （株）、 （株）和 （ 株）；亚临床乳房炎奶牛乳样中仅检测到 的 和 毒力基因，检出 ２％ ５ ７．７％ ２ ３１．２％ １０ ＳＡ 犛犈犃 犘犞犔 率分别为 （株）和 （ 株）。表明临床与亚临床乳房炎奶牛乳汁中 菌株携带的毒素基因不一样， ７．０％ ３ ８４．１％ ３７ ＳＡ 可能是临床乳房炎菌株的重要致病基因， 可能是亚临床乳房炎菌株的重要致病基因。 株 使用 犛犈狊 ＰＶＬ ６９ Ｓ