干预NF-kB信号通路对新生大鼠大脑皮层神经元死亡的影响.pdg.pdf

干预NF—KB信号通路对新生大鼠大脑皮层神经元死亡 的影响 中文摘要 【目的】 观察干预NF．xB通路对神经元NF．KB活化的规律以及神经元死亡包括自 噬、凋亡和坏死的影响。 【方法】 取24小时内出生的大鼠，取大脑皮层后进行原代培养神经元，经细胞免疫 化学鉴定为神经元后，将培养的神经元分为空白组、激活组、抑制组，其中抑制 组细胞先加入激活剂后再加入抑制剂。各组再分别分成五个时间点组lh、6h、 B蛋白的表达，w矗t锄 12h、24h、48h。各时间组再分别作免疫细胞荧光观察NF．K 【结果】 1． 激活组在各个时间点的NF—KB蛋白表达均高于抑制组和空白组，激活组从 6h到24h，NF—KB蛋白表达逐渐增加，24h达到高峰，48h稍下降。抑制组 各个时间点的NF—KB蛋白表达均小于激活组，各时间点两两比较有显著的 统计学意义(PO．01)。 2．凋亡在激活组表达高于抑制组和空白组，分别与空白组和抑制组比较， 6h一48h均有显著统计学意义(pO．01)；凋亡在抑制组表达高于空白组， 12h一48h时间点内抑制组和空白组两两比较均有显著统计学意义(P薹O．01)。 3．坏死在激活组和抑制组中的表达随时间的增加而增加，激活组在各个时间点 内坏死表达均高于抑制组，尤以24h、48h明显(p0．01)。 4．激活组自噬蛋白Beclinl随时间增加而增高，24h时神经元表达Beclinl 点内激活组分别与抑制组和空白组比较，均高于抑制组和空白组，有显著统 计学意义(P0．01)。 【结论】 应用NF—KB激活剂佛波醇酯(PMA)干预神经元可以促使NF—KB蛋白的表 B通路 达量升高，并且随时间的增加而升高，24h达到高峰，48h稍下降；NF—K 以坏死为主，NF—KB抑制剂吡咯醛二硫氨基甲酸(PDTC)能够降低神经元的凋 亡和坏死表达，但不能完全抑制凋亡和坏死的发生；凋亡和坏死的发生机制可能 与NF—KB通路激活后炎性因子的表达有关；PDTC有望成为治疗创伤性脑损伤后 继发性脑损伤的新药。 神经元NF-KB通路激活后诱导的凋亡和自噬共存，自噬发生后可能向凋亡 转化。研发抑制神经元自噬的新药有望为治疗创伤性脑损伤后继发性损伤提供一 条新的思路。 【关键词】 创伤性脑损伤；神经元；NF．KB；PMA；PDTC；凋亡；自噬；坏死 2 deathofneonatalratcerebralcorticalinterf．eredwith Neuronal NF-kB signalingpathway Abstract mee髓ctofdeam observet11emleofn咖nalNF-1cBaCtiVation锄d 【objec晰e】T0 meNF—KB modeof andnecrosis by neurons，includingautophagy，apoptosis patllway w嬲Interfb陀d． meratstbraincorticalst0 somerats bimledin24hourS．Taked 【Me