固定化细胞生产乙醇研究课件摘要.pptVIP

固定化细胞生产乙醇研究 传统的乙醇发酵 乙醇发酵：在无氧条件下，微生物（如酵母菌）分解葡萄糖等有机物，产生酒精、二氧化碳等不彻底氧化产物，同时释放出少量能量的过程。 酵母发酵产乙醇的途径有ED途径、EMP途径、三羧酸循环途径。 传统的乙醇发酵：固态发酵和液态发酵 固态发酵：发酵物料含水量少，40%-60%，呈固体状态；菌种多，发酵条件难以控制，抗杂菌能力强；发酵产物组成复杂，但风味好；生产规模较小。 液态发酵：含水量多，呈液体状态；单菌种；生产规模大。 以纤维素的乙醇发酵为例，发酵的方法可以分为： ⑴直接发酵法 直接发酵法的特点是基于纤维分解细菌直接发酵纤维素产生乙醇，不需要经过酸解或酶解的前处理过程。该方法工业简单，成本低廉；但乙醇产率不高，产生有机酸等副产物。 ⑵ 间接发酵法 间接发酵法先用纤维素酶水解纤维素，酶解得到的糖液进行发酵。此法中的乙醇产物受末端产物、低浓度细胞及基质的抑制。为了克服乙醇产物的抑制，必须不断的从发酵罐中移出乙醇。 ⑶混合菌种发酵法 混合菌种发酵法可以利用纤维素水解液中葡萄糖、木糖、阿拉伯糖等单糖和寡糖的混合物。针对多种碳源发酵乙醇的菌株不多，工业及设备满足代谢上有一定困难，碳源利用率低，乙醇产率低等问题。 ⑷ 同步糖化发酵法 （SSF法） SSF法是在酶水解糖化纤维素的同一容器中加入产生的乙醇的纤维素发酵菌，使糖化产生的葡萄糖和纤维二糖转化为乙醇。纤维素的酶水解糖化和发酵过程在同一装置内连续进行，由于葡萄糖不断发酵利用，消除了底物葡萄糖浓度的增加对纤维素酶的反馈抑制作用。在工艺上简化了设备，节约了总生产时间，提高了生产效率。但SSF法也有一些抑制因素，如木糖的抑制作用、糖化温度和发酵温度不协调等。 固定化酶糖化发酵法： 使用同一种微生物完成纤维素酶的分泌，纤维素的糖化和发酵过程。固定化发酵法仅利用一种微生物产生的纤维素酶和半纤维素酶，酶解产生的糖仍由同一株菌来完成发酵的过程。固定化酶比游离酶有较好的稳定性，可以重复使用和回收，又便于连续操作，且能提高发酵器内细胞浓度和乙醇浓度。此法工艺简单，历时短，提高设备利用率，得到国内外同行的重视。 相比其他的发酵方法，固定化发酵还有其他的优点：耐毒性强，且与产物易分离；能实现连续操作而不产生流失现象。 例：纤维素水解后含有葡萄糖和木糖，而运动发酵单胞菌只能利用葡萄糖，因此田沈等将运动发酵单胞菌固定在海藻酸钠上放入纤维素水解液里进行发酵，等水解液中的葡萄糖分解完后再拿出，剩下的则用能利用木糖发酵的微生物继续发酵。 根据研究后数据显示，在固定化细胞乙醇发酵产率为0.51，达到理论产率的100%。 不仅在纤维素发酵乙醇中用上固定化技术，在其他乙醇发酵中也有不少固定化技术的应用。 千烟一郎等将酵母固定于K-角叉菜胶，利用这种固定化增殖酵母可稳定、连续生产一年以上，并且生产速率比以前的发酵法快10多倍。 据Arcuri等报道，将运动发酵单胞菌ATCC10988用玻璃纤维吸附，使用由葡萄糖及酵母膏配成的培养基，连续发酵28天，乙醇生产能152g/(L·h)，这要比固定化酵母的乙醇生产能力大得多。 在啤酒乙醇发酵方面： 李娜等对啤酒酵母细胞的固定化进行了研究，使用2%的海藻酸钠与4%的氯化钙反应包埋酵母细胞，测定了固定化酵母生产啤酒过程中双乙酰含量的变化及发酵速度，结果表明，在pH4.3，填充量0.45g/ml进行发酵生产啤酒，发酵速度快，双乙酰含量低，可酿成淡爽型风味良好的啤酒。 Linko等人将酵母细胞固定于海藻酸钙凝珠胶内，置于填充柱式反应器内，用于麦芽汁连续发酵生产啤酒，可维持几个月，其麦芽汁在柱式反应器内的停留时间为2h，啤酒乙醇含量可达到4.5%。 上海工业微生物所和上海光华啤酒厂做了很多研究，结果表明固定化酵母生产啤酒的发酵时间在48h以内，后置发酵时间在7d左右，均比传统工艺缩短一半时间，该固定化酵母细胞可反复使用30d以上，酿成的啤酒口味正常，泡沫性良好，各项理化指标均符合标准。 王运吉等利用海藻酸钠固定化酿酒酵母和流化床反应器进行介质循环发酵，用于研究循环流速对发酵周期的影响。结果表明，发酵周期随循环流速的增加而减少，而双乙酰浓度则随流速的增加而提高。 现在固定化技术不仅在生化工程和酶工程占有十分重要的地位，在医学、物理化学、高分子化学等都有广泛的用途。 随着科学技术的提高，人们充分发挥了固定化酶和固定化细胞在革新工艺和降低成本方面的巨大潜力，固定化不再仅限于酶，也可以是植物细胞、动物细胞或细胞器。由此可见，固定化技术的发展必将引起发酵工业和化学合成工业的巨大变革。 固定化细胞发展简史 一、1916年美国的奈尔森和格里芬发现人工载体氧化铝和焦炭上结合的蔗糖仍具有催化活性。从此科学家开始了固