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生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN ( ) 2015, 31 5 :186-193 来源于瘤胃厌氧真菌 Neocallimastix frontalis 木聚糖酶 在毕赤酵母中的表达 1 1，2 1 2 汪艳  李晓   陈勇  武运 （1. 新疆农业大学动物科学学院，乌鲁木齐 830052 ；2. 新疆农业大学食品科学与药学学院，乌鲁木齐 830052） 摘 要 ： 厌氧真菌Neocallimastix frontalis 是瘤胃中降解木聚糖和纤维素的主要微生物之一，其木聚糖酶具有潜在的应用价 值。对来源于Neocallimastix frontalis 木聚糖酶基因Xyn11B 进行密码子优化 ；通过全基因合成优化后的木聚糖酶基因Xyn11Bm ，构 建该基因的酵母表达载体pPIC9K-Xyn11Bm ，并在毕赤酵母GS115 中诱导表达。摇瓶水平时，重组Xyn11Bm 酶活性最高为4 874.8 U/mL。在10 L 发酵罐中诱导96 h 后，重组Xyn11Bm 的酶活性为5 139.7 U/mL，菌体湿重和干重达到216.7 g/L 和117.3 g/L。酶学 性质分析表明，重组Xyn11Bm 的最适反应温度为50℃，最适反应pH 为5.0。在pH5.0-8.0 时该酶具有较好的稳定性，但温度稳定 性较差。底物特异性分析表明，重组Xyn11Bm 可水解燕麦木聚糖、桦木木聚糖和可溶性木聚糖4-O-Me-D-glucurono-D-xylan，但不 降解地衣多糖和大麦β-葡聚糖。结果表明重组Xyn11Bm 具有潜在的应用价值。 关键词 ： Neocallimastix frontalis ；木聚糖酶 ；毕赤酵母 ；密码子优化；酶学性质 DOI ：10.13560/ki.biotech.bull.1985.2015.05.029 Expression of a Xylanase Gene Originated from Rumen Anaerobic Fungi Neocallimastix frontalis in Pichia pastoris 1 1，2 1 2 Wang Yan Li Xiao Chen Yong Wu Yun （1. College of Animal Science ，Xinjiang Agricultural University ，Urumqi 830052 ；2. College of Food Science and Pharmacy ，Xinjiang Agricultural University ，Urumqi 830052 ） Abstract: The anaerobic fungus Neocallimastix frontalis is one of main microorganisms in the rumen degrading xylan and cellulose and its xylanase has the potential application value. In this study, a xylanase gene Xyn11B originated from N. frontalis was codon op